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目的:构建黄芩-槐花干预高血压的“活性成分-作用靶点”网络,分析并验证其治疗高血压的物质基础及作用机制;进一步鉴定黄芩-槐花的有效成分并通过动物实验研究黄芩-槐花治疗高血压及肾损伤的作用和机制。方法:(1)检索中药系统药理学数据库TCMSP中黄芩与槐花的化学成分及作用靶点,与TTD、OMIM、CTD和Genecards数据库中的高血压相关靶点取交集,运用网络分析软件Cytoscape绘制“活性成分-作用靶点”网络。通过Metascape在线分析平台进行基因GO功能和KEGG通路富集分析,最后使用分子对接软件Sybyl分析黄芩和槐花中的关键成分与高血压靶点的结合情况,并进一步采用动物实验进行验证;(2)运用高效液相色谱-质谱法鉴定黄芩和槐花的化学成分;(3)选取自发性高血压大鼠(SHR)为高血压肾损伤模型,通过观察黄芩-槐花对模型血压、肾功能以及肾脏组织病理学改变的影响,明确黄芩-槐花治疗高血压及其肾损伤的作用;(4)运用16S rRNA高通量测序技术分析各组大鼠的肠道微生物,研究黄芩-槐花对SHR肠道菌群丰富度和多样性的影响;并通过组织学染色观察各组大鼠肠道的病理组织学改变,运用免疫荧光、免疫组化和Western blot法检测肠道屏障相关蛋白的表达,明确黄芩-槐花对肠道微生态的调节作用;(5)通过酶联免疫吸附试验(ELISA)分析大鼠血清硫酸吲哚酚(IS)的含量,生化试剂盒检测肾脏组织中氧化应激相关指标的水平,明确黄芩-槐花对肠源性毒素IS及IS诱导的氧化应激反应的影响;ELISA检测大鼠粪便中短链脂肪酸(SCFAs)的含量,实时定量PCR法检测肾脏组织中与血管收缩和舒张功能相关的SCFAs受体Olfr78和GRP41的mRNA表达,明确黄芩-槐花对菌群代谢产物SCFAs及其受体的影响;同时通过ELISA分析与SCFAs密切相关的炎性因子水平,明确黄芩-槐花对炎症反应的影响。结果:(1)黄芩-槐花的“活性成分-作用靶点”网络包括26个化合物,45个高血压靶点。基因GO功能分析提示黄芩-槐花治疗高血压的作用靶点功能涉及分子功能、生物过程及细胞组成三个方面;KEGG通路富集分析揭示其作用机制可能与HIF-1信号通路、钙信号通路、Apelin信号通路等17条信号通路相关。分子对接预测槐花中的异鼠李素与一氧化氮合酶作用力强,黄芩中的苏荠黄酮与血管紧张素转化酶作用力强。动物实验进一步验证此结果:异鼠李素能升高SHR血清和内皮中一氧化氮合酶的水平;苏荠黄酮能降低SHR血清中血管紧张素转化酶的水平;(2)高效液相色谱-质谱法鉴定出黄芩-槐花有31种化学成分,结合入血成分较少的分析,提示未入血成分可能通过肠道菌群途径发挥作用;(3)动物实验发现,黄芩-槐花能降低SHR的血压,降低血肌酐、尿素氮和尿微量白蛋白水平,减少胶原纤维沉积,抑制肾纤维化,改善肾脏功能;(4)16S rRNA高通量测序分析提示黄芩-槐花提高菌群的生物多样性和丰富度,降低菌群紊乱指标一厚壁菌门和拟杆菌门的比值(F/B);动物实验结果表明黄芩-槐花增加肠道紧密连接蛋白的表达,修复肠道屏障结构;(5)黄芩-槐花减少大鼠血清中的硫酸吲哚酚含量,并降低肾脏氧化应激标志物的水平,增加抗氧化酶的含量;黄芩-槐花增加大鼠粪便中SCFAs的含量,抑制与血管收缩功能相关的SCFAs受体Olfr78的mRNA表达,增加与血管舒张功能相关的SCFAs受体GPR41的mRNA表达,同时减少血清炎性因子的含量。结论:黄芩-槐花具有多成分及多途径的作用特点。黄芩-槐花能有效治疗高血压及其肾损伤,其作用机制可能与改善肠道菌群紊乱、修复肠道屏障功能、减少硫酸吲哚酚并抑制肾脏氧化应激反应、增加菌群代谢产物SCFAs、调节SCFAs相关受体水平及减少炎症反应相关。