利用体细胞杂交将獐毛的抗盐外源基因转入小麦的研究

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该实验首先对獐毛(Aeluropus littoralisl sinensis)愈伤组织进行耐盐变异体的筛选,得到了在2%NaCl浓度下生长良好的变异体.2%NaCl浓度下,变异体的相对生长显著大于未经筛选的愈伤组织,经无NaCl培养后再移植到含2%NaCl培养基中,变异体的相对生长也极显著地大于同一情况下未经筛选的愈伤组织.獐毛耐盐变异来体来源的原生质体经紫外线照射后作为供体,普通小麦(Triticum aestivum)济南177悬浮细胞系分离的原生质体作为受体;将二者分别调成1×10<6>个ml/的悬浮液后按小麦原生质体:獐毛原生质体2:1的比率混合,用PEG法诱导融合.对融合再生细胞系进行形态学、酯酶和过氧化物同工酶分析、染色体检查、RAPD分析,确定参加分析的32个细胞系中7个细胞系为杂种.用于融合的双亲无分化能力,而7个杂种细胞系中有4个恢复了部分分化能力,可以分化出绿点、根或白化苗,从而再次证明了该实验室在小麦济南177与族毛麦、羊草、高冰草和新麦草的四种组合体细胞杂交中发现的再生互补现象,也不同程度地存在于小麦与獐毛的体细胞杂交中,并对这一现象的可能影响因素进行了分析.对杂种与亲本愈组织的抗盐性进行比较,结果表明杂种能耐受0.3-1%的NaCl浓度,在1%NaCl浓度上抗盐性明显高于小麦,与未经筛选的獐毛愈伤组织耐盐性相一致,这说明利用体细胞杂交能成功地进行抗性状的转移.
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