论文部分内容阅读
目的：应用实时荧光定量-聚合酶链反应法（fluorescent real-time polymerase chainreaction， RT-PCR）对高脂喂养诱导非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholicsteatohepatitis，NASH）及正常的新西兰兔粪便中大肠埃希菌、乳酸杆菌及双歧杆菌属的数量进行定量检测分析。方法：将14只雄性新西兰兔随机分为模型组和正常对照组，模型组用高脂饲料喂养，形成NASH模型，正常对照组用普通饲料喂养，共12周，处死后取肝脏组织做常规病理学HE染色，显微镜下观察肝细胞形态，用试剂盒提取粪便细菌基因组DNA，并根据大肠埃希菌、乳酸杆菌及双歧杆菌属的16SrDNA基因序列设计细菌通用引物及每种细菌的种属特异性引物，进行RT-PCR反应，定量分析两组中这三种细菌的数量。结果：模型组新西兰兔肝组织病理学检测见肝细胞呈广泛脂肪性变伴大量气球样改变，提示NASH造模成功。正常对照组与模型组动物粪便中细菌数量分别为大肠埃希菌（11.48±1.09，7.39±0.81）、乳酸杆菌（4.94±0.95，5.65±0.91）、双歧杆菌属（4.07±0.97，6.45±0.90），经统计学分析表明模型组较对照组大肠埃希菌数量明显增多（t=-3.282,P=0.013），而乳酸杆菌、双歧杆菌属数量的变化无明显统计学意义（t1=-1.204,P1=0.268；t2=0.423,P2=0.683）。结论：形成NASH疾病模型的新西兰兔粪便内大肠埃希菌数量较正常对照组明显增多，提示大肠埃希菌数量的增多与非酒精性脂肪性肝病（Nonalcohdic fatty liver disease，NAFLD）的发生或发展有关联，而乳酸杆菌及双歧杆菌数量无明显变化，其与NAFLD的关系有待于进一步的研究。