【摘 要】
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骨骼肌是人体最丰富的组织,对于生命活动,尤其是运动的维持至关重要。但成年人体内可再生的骨骼肌干细胞数量极其有限,在肌肉发生比较大的损伤或疾病时,不足以补充受损的肌肉
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骨骼肌是人体最丰富的组织,对于生命活动,尤其是运动的维持至关重要。但成年人体内可再生的骨骼肌干细胞数量极其有限,在肌肉发生比较大的损伤或疾病时,不足以补充受损的肌肉细胞。胚胎干细胞一直是组织和器官再生领域的研究热点,在体外可分化为骨骼肌用于再生医学,但其分化的调控机制尚不明确。因此,研究胚胎干细胞骨骼肌分化的作用和机制,可为骨骼肌疾病的细胞替代疗法和药物筛选提供途径。研究发现Rbm24在骨骼肌中高表达,在小鼠胚胎干细胞分化过程中,Rbm24升高伴随着骨骼肌标记基因的上调。我们利用Cre-Loxp可诱导调控系统,在小鼠胚胎干细胞骨骼肌分化过程中诱导Rbm24过表达,探索Rbm24在骨骼肌分化过程中的作用。我们利用悬滴法形成拟胚体诱导胚胎干细胞体外分化,通过实时荧光定量RCR检测Rbm24与骨骼肌特异性标志物的表达水平。结果显示,在分化过程中诱导Rbm24过表达,与对照组相比,Pax3、Pax7和MyoG的mRNA表达量明显增加。免疫荧光染色结果显示,过表达Rbm24后,MyoG和MyHC的蛋白表达也显著上升。并且在分化第25天,观察到Rbm24过表达组出现骨骼肌样细胞持续性抽动。表明Rbm24促进了小鼠胚胎干细胞向骨骼肌分化。最后,在C2C12成肌细胞系中,也验证了 Rbm24对骨骼肌分化的促进作用,表现在敲低Rbm24,抑制C2C12向骨骼肌分化;过表达Rbm24则促进其分化,揭示了 Rbm24在骨骼肌分化过程中的重要功能。
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