肾癌中CD133~+细胞和CD133~-细胞生物学特性差异的研究

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目的:人CD133(Human prominin-1 PROM-1)是在不同组织中鉴定干/祖细胞或肿瘤干细胞(肿瘤启动细胞)(cancer stem cells,tumor-initiating cells)的标志物。本文目的在于研究对比人肾癌细胞系786-0和OS-RC-2中CD133+细胞和CD133-细胞的生物学特性差异。方法:应用流式细胞仪检测肾癌细胞系786-0和OS-RC-2中CD133的膜表达状况;以免疫磁珠法将CD133+细胞和CD133-细胞分离纯化,比较两者在光镜下的形态、生长特点、体外增殖能力、长期分化能力及体外克隆形成率的差异;流式细胞术分析两者细胞周期分布的变化,采用MTT法比较两者对化疗药物顺铂(DDP)敏感性的差别。结果:786-0和OS-RC-2中均有CD133的少量表达(8.12±0.86)%、(6.83±0.20)%,CD133+细胞相比CD133-细胞具有较强的体外增殖、克隆形成及长期分化能力;786-0中CD133+细胞、CD133-细胞以及未分选细胞群体倍增时间分别为19.46h、22.03h、20.03h:OS-RC-2中CD133+细胞、CD133-细胞以及未分选细胞群体倍增时间分别为18.84h、22.26h、21.18h;786-0和OS-RC-2中CD133+细胞克隆形成率分别为(38.47±4.27)%和(32.47±5.21)%,CD133-细胞克隆形成率分别为(21.38±3.58)%和(26.04±7.12)%;786-0中CD133+细胞、CD133-细胞G0/G1期分别为(65.77±0.81)%、(44.9±2.21)%,S期分别为(13.65±0.42)%、(39.66±1.25)%,G2/M分别为(10.83±0.35)%、(12.24±0.31)%,OS-RC-2中CD133+细胞、CD133-细胞G0/G1期分别为(61.58±1.32)%、(42.3±3.11)%,S期分别为(12.17±0.22)%、(37.80±0.32)%,G2/M期分别为(11.36±0.22)%、(16.23±0.36)%,CD133+细胞、CD133-细胞两者相比差异均有显著性统计学意义(P<0.01)。MTT法分析表明CD133+细胞、CD133-细胞对DDP敏感性差异无统计学意义。结论:证实肾癌细胞系中CD133+细胞具有肾癌干细胞的部分特征,能否作为肾癌干细胞的表面标志还需要进一步的实验加以明确。
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