【摘 要】
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目的:本研究利用星形胶质细胞体外培养模型,观察转化生长因子-β1(TGF-β1)对星形胶质细胞产生Jagged1基因的影响,并探讨其对多发性硬化(MS)可能发病机制,为MS脱髓鞘发生提供
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目的:本研究利用星形胶质细胞体外培养模型,观察转化生长因子-β1(TGF-β1)对星形胶质细胞产生Jagged1基因的影响,并探讨其对多发性硬化(MS)可能发病机制,为MS脱髓鞘发生提供新的理论依据。方法:1.建立星形胶质细胞体外培养体系:用新生1~2 d C57BL/6小鼠乳鼠,无菌取大脑皮质,经去除脑膜、消化、过筛网等步骤,制成初细胞悬液,接种至已包被多聚赖氨酸的培养瓶中,进行传代培养即得纯化的星形胶质细胞。并利用神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的特异性抗体来检测星形胶质细胞。2.建立TGF-β1诱导星形胶质细胞表达Jagged1体系:先予脂多糖(LPS)活化星形胶质细胞,使星形胶质细胞由静息状态转变为活化状态,然后给予TGF-β1,培养24 h,提取星形胶质细胞的mRNA,观察各个时间点(0、6、12及24 h)Jagged1 mRNA的水平。结果:1.对培养的星形胶质细胞进行星形胶质细胞的骨架蛋白(GFAP)免疫荧光染色,显示绝大多数细胞为GFAP阳性。2.TGF-β1促进星形胶质细胞产生Jagged1 mRNA,并随培养时间的延长,星形胶质细胞中Jagged1 mRNA水平逐渐衰减(P<0.05)。结论:1.成功培养原代星形胶质细胞(图1)。经传代纯化培养后纯度达到95%以上。2.TGF-β1能使活化的星形胶质细胞产生Jagged1 mRNA,可能导致Jagged1/Notch通路异常激活,而导致髓鞘修复障碍。
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