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目的：卵巢癌是妇科常见的恶性肿瘤，由于卵巢癌迄今仍无完善的早期诊断方法，晚期病人疗效不佳，故其死亡率居妇科恶性肿瘤的首位，成为妇科肿瘤中威胁最大的疾病。p53 基因是大家公认的抑癌基因，在人类 50%以上的肿瘤组织中均发现了 p53 基因的突变，而在妇科肿瘤中以卵巢癌 p53 的突变发生率最高。p53 基因部分多态性位点影响 p53 蛋白的结构与功能，从而与肿瘤的易感性有关，目前研究发现，其中有三个多态性位点与肿瘤的发病有关，位于第 72 密码子 BstUⅠ切点区的限制性酶切位点（ Arg/Pro），第三内含子区 16bp 插入 /缺失多态性（PIN3），第六内含子的 MSPⅠ的限制性酶切位点。已有研究表明，p53 第三内含子与第六内含子的多态性具有强的连锁不平衡，故本研究选用第 72 位密码子与第三内含子作为研究位点。本研究旨在探讨 p53 第 72 位密码子 Arg/Pro及 PIN3 多态性在我国北方汉族女性卵巢癌人群中的分布情况,为卵巢癌的预测及发病机理提供依据，并研究其与临床特征的相关性。 方法：本实验采用病例-对照研究方法对卵巢癌与 p53第 72位密码子 Arg/Pro 及 PIN3多态性的相关性进行研究。124 例上皮性卵巢癌患者为 2001.12— 2003.12 于河北医科大学附属第四医院进行手术治疗与化疗的北方籍汉族患者 1<WP=4>中 文 摘 要（化疗患者亦为于我院进行手术治疗后追加化疗的卵巢癌患者）。所有卵巢癌患者均经组织病理学诊断为上皮性卵巢癌。根据病理类型分组包括浆液性卵巢癌 72 例，黏液性卵巢癌 9 例，宫内膜样癌 43 例；采用国际妇产科联盟（FIGO）的临床病理分期方法，将卵巢癌分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期，将Ⅰ、Ⅱ期定义为早期，Ⅲ，Ⅳ期定义为晚期，早期卵巢癌 40例，晚期卵巢癌 84例。 128例正常对照为同一地区的健康汉族女性个体，家族中无恶性肿瘤患者。卵巢癌患者组与对照组的一般情况通过问卷调查形式，包括年龄，孕次，产次，初潮年龄等。在征得本人或其家属同意后，无菌操作下采集新鲜外周静脉血 5 ml，采用蛋白酶K－氯化钠盐析法提取基因组 DNA。 根据第 72 密码子的 Arg/Pro 核苷酸序列合成特异性引物，分别利用两对引物做两管平行 PCR 扩增 Arg 与 Pro 两个等位基因。扩增产物经 2%的琼脂糖，在 1×TAE 缓冲液中电泳，同时上样阴性对照，并选择 100 bp DNA marker平行电泳，溴化乙锭（EB）染色，在紫外灯下观察扩增结果。Arg 纯合子在 141 bp 处产生一个片段， Pro 纯合子在177 bp 处产生一个片段， Arg/Pro 杂合子产生 141bp 和177bp 两个片段。 根据第三内含子序列合成特异性引物，对含有 16bp 重复序列的第三内含子进行扩增。扩增产物在 1×TBE缓冲液中经 12%聚丙烯酰胺凝胶电泳，银染后观察结果。电泳片段 119bp 表示 A/A 基因型（16bp 纯合缺失），135bp 表示为 A`/A`基因型（16bp 纯合插入），而两条带都存在者为A/A`基因型。计算组间基因型、各等位基因频率，基因型 2<WP=5>中 文 摘 要及等位基因频率显著性检验分别用 2×2、2×3 行×列表χ2检验。 结果：(1)卵巢癌组和对照组的均衡性检验。健康对照组与病例组年龄，初潮年龄、孕次，产次构成无显著差异（P>0.05），说明病例组与对照组具有良好的可比性。(2)上皮性卵巢癌患者及健康对照组 p53 第 72 位密码子Pro/Arg 与 PIN3 基因型频率的观察值均符合 Hardy-Weinberg 平 衡 。 (3) 卵 巢 癌 组与 对 照 组 的 Arg/Arg 、Arg/Pro、Pro/Pro 基因型分布无显著性差异（P>0.05），Arg 、 Pro 等 位 基 因 频 率 在 两 组 间 无 显 著 性 差 异（P>0.05）。将卵巢癌组按照病理类型分组，浆液性卵巢癌和宫内膜样卵巢癌分别与正常对照组相比未发现该多态位点基因型频率与等位基因频率有显著性差异(P>0.05)。将卵巢癌按 FIGO 分期分组后，Arg/Arg、Arg/Pro、Pro/Pro 基因型分布在早期与晚期卵巢癌间有显著性差异（P=0.013），Arg、Pro 等位基因频率在两组间比较差异有显著性（P=0.006），含有 Pro 等位基因的基因型（Arg/Pro +Pro/Pro ）与 Arg/Arg 基因型频率在两组间比较差异亦有显著性（P=0.004）。调整年龄、初潮年龄、孕次、产次后，分别与携带 Pro/Pro 和 Arg/ Pro 基因型的卵巢癌患者相比，携 带 Arg/Arg 基因型的患者容易进展为晚期卵巢癌（ OR=6.51 95%CI=1.65~25.59 和 OR=5.0395%CI=1.37~18.52），进一步将 Arg/Pro 和 Pro/Pro 合并，将 Arg/Arg 基因型与之进行比较，患晚期卵巢癌的 OR 及95%CI为 5.53（1.56~19.58）。(4)在 124例上皮性卵巢癌中发现 2例 A`/A`，而在 128 例对照组中未发现此种基因型， 3<WP=6>中 文 摘 要由于 A`/A`基因型较少，无法单独进行统计学处理，现将A/A`与 A`/A`两种基因型合并。卵巢癌组与对照组基因型分布无显著性差异（P>0.05），A、A`等位基因频率在两组间比较亦无显著性差异（P>0.05）。将卵巢癌按病理类型分组，浆液性卵巢癌和卵巢宫内膜样癌?