PCR-RFLP方法在蛔虫种间鉴别上的应用

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该研究应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性方法(简称PCR-RFLP)鉴别了4种不同蛔虫.从猪蛔虫、人蛔虫、犬弓首蛔虫及鸡蛔虫虫体中分别提取基因组DNA,利用一对引物(0102-131,0102-132),通过PCR法扩增得到长度分别约为450bp、450bp、530bp、550bp的PCR产物.利用一对引物(0320-144,0320-145),通过对猪蛔虫、人蛔虫、犬弓首蛔虫及鸡蛔虫的基因组DNA进行扩增,得到长度分别约为980bp、980bp、1050bpb、1070bp的PCR产物.经与国外报道相比较,确定完整扩增出4各蛔虫的第一、第二内部转录间隔区(ITS-1,ITS-2)及5.8S核糖体RNA基因.PCR产物经限制性内切酶HaeⅢ酶切鉴定,通过产生的特异性片段可以区分出猪蛔虫与人蛔虫.通过PCR-RFLP分析,初步推测猪蛔虫与人蛔虫仍为两个独立虫种,但进一步的确认需要进行虫种杂交实验.
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