丹参、rhBMP-2及rhTGF-β1对人牙周膜成纤维细胞增殖分化的影响

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牙周组织再生重建的关键是牙周膜细胞(Periodontal Ligament Cells,PDLCs)的增殖分化。而牙周病损区域由于病损,牙周膜细胞来源匮乏,因此寻求有效的促进细胞增殖分化的方法和途径是目前牙周再生研究的重点和热点。人牙周膜细胞是一个异质性细胞群。其中的牙周膜成纤维细胞(Human Periodontal LigamentFibroblasts,HPDLFs)在参与牙周膜和邻近硬组织的维持、修复和再生方面起着十分重要的作用。丹参是具有活血化淤作用的传统中药,近年来的研究表明:丹参具有改善局部微循环、干预炎症反应、调控生长因子分泌、促进组织修复重建的作用。动物实验表明:丹参复合生物膜能有效地促进牙周组织再生重建。生长因子是一种对细胞生长和分化有显著调节作用的多肽,国内外大量研究认为。重组Ⅱ型骨形成蛋白(rhBMP-2)和重组Ⅰ型转化生长因子(rhTGF-β1)对牙周膜成纤维细胞增殖与分化有十分重要的促进作用。本实验将丹参,rhBMP-2,rhTGF-β1引入人牙周膜成纤维细胞体外培养实验中,研究丹参与rhBMP-2及rhTGF-β1对人牙周膜成纤维细胞增殖分化的影响。目的:观察并比较丹参、rhBMP-2、rhTGF-β1对HPDLFs的增殖与分化影响的剂量、时间-效应依赖关系,并寻找丹参的最佳效应浓度。方法:选取因正畸治疗需拔除的前磨牙,刮取根中1/3牙周膜组织,采用牙周膜细胞体外培养技术进行牙周膜细胞的培养,用四唑盐比色法(MTT)和酶动力学方法,观察不同浓度的丹参、rhBMP-2、rhTGF-β1对HPDLFs增殖与分化的影响。结果:1丹参从90mg/l的浓度开始,可有效地促进HPDLFs的增殖,并呈现剂量-效应依赖关系。2 360 mg/l的丹参,200μg/l的rhBMP-2,5μg/l的rhTGF-β1对HPDLFs的增殖与分化以及成骨特性方面匀有明显的促进作用,且三者之间没有显著性差异。结论:丹参能够有效的促进HPDLFs的增殖与分化,是一种值得进一步研究探讨的促进牙周组织再生的新型药物。
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