鹿茸中有效成分的提取与分离关键技术及其抗氧化活性的研究

被引量 : 0次 | 上传用户:xoyo7908114
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
鹿茸为鹿科动物梅花鹿或马鹿的雄鹿密生茸毛的未骨化的幼角,是传统名贵中药,具有温肾壮阳、益精补血、强健筋骨等功效。药物分析表明,鹿茸中含有多种具有重要生理活性的物质,其中含有的雌激素、孕酮等对女性更年期综合症有预防和治疗作用;次黄嘌呤、尿嘧啶、胆固醇、对羟基苯甲醛等具有抑制单胺氧化酶的抗衰老作用;胰岛素样生长因子-1(IGF-1)是生长调节素的一种,无论是在活体内还是对离体培养的组织和细胞均能表现出一定的生物学功能,主要对糖尿病及其并发症等有着特殊的疗效。传统的加工方法得到的鹿茸产品加工方式粗放落后,易使鹿茸中的一些活性成分损失而得不到充分利用。因此,采用先进分离技术对鹿茸中的有效成分进行提取、分离及其活性分析,对科学地利用中国的珍贵中药鹿茸资源,提高其附加值及促进中药现代化具有重要意义。本文对建立鹿茸中的性激素和生物碱基(尿嘧啶、次黄嘌呤和尿苷)的分析方法进行了研究。选择甲醇作为最佳提取溶剂,优化了热回流提取条件,并利用放射免疫法对鹿茸中的雌二醇和孕酮进行了定量分析。同时,建立了快速测定鹿茸中生物碱基成分的HPLC方法,方法学研究结果表明,在最佳色谱条件下,尿嘧啶、次黄嘌呤和尿苷分离度好,具有良好的精密度和重现性,平均加样回收率在98.39%~103.4%范围内。利用建立的上述方法对鹿茸中的性激素和生物碱基成分分别进行了含量测定,从而为后面的回收率计算提供数据基础。在对鹿茸中的有效成分进行提取、分离研究过程中,本文首先利用超临界CO2结合共溶剂萃取技术提取鹿茸中的性激素成分,考察了乙醇浓度、夹带剂流速、萃取温度、萃取压力和萃取时间对雌二醇、孕酮提取率和含量的影响,得到了优化的超临界萃取条件。然后采用超声强化萃取技术对鹿茸的超临界萃余物中的IGF-1成分进行了提取研究,考察了溶剂的pH、溶剂用量、提取温度、提取时间等对鹿茸的超临界萃余物中的IGF-1提取率的影响,同时还考察了超临界萃取条件对萃余物中IGF-1活性保留率的影响,从而确定了最佳的综合提取工艺条件。实验结果表明:以75%乙醇作为夹带剂,夹带剂流速为2.0mL/min,萃取压力为30MPa,萃取温度35℃、萃取时间30min,二氧化碳用量为15L/g的条件下,孕酮和雌二醇的回收率均高于88%,其中孕酮的回收率是热回流提取的1.9倍;雌二醇的回收率是热回流提取的1.5倍。其溶剂消耗仅是热回流提取消耗的1/6。同时萃余物中得到的IGF-1的活性保留率为93.68%。此外,本文还对超声强化萃取法得到的鹿茸提取液中所含蛋白质、氨基酸及酸性多糖等多种成分进行了定量分析。对超临界萃取物进行定性定量分析的结果表明,萃取物中除含有性激素、生物碱基、对羟基苯甲醛、磷脂等生物活性物质外,还含有较高含量的胆固醇成分,如果将其开发成具有一定功效的保健品或药品,可能会由于其中的高胆固醇含量而对人体的健康产生一定的影响。因此,本文采用单因素实验,考察了β-环糊精饱和溶液用量与萃取物质量比、包合温度、包合时间和萃取物的水稀释浓度等对鹿茸的超临界提取物中胆固醇脱除率的影响,确定了β-CD饱和水溶液包合法脱除鹿茸超临界萃取物中胆固醇的最佳条件。实验结果表明,在最佳工艺条件下,鹿茸超临界萃取物中胆固醇脱除率为91.64%,尿嘧啶、次黄嘌呤和尿苷三种生物碱基成分保留率分别为77.31%,82.58%,85.19%,雌二醇保留率达到90.30%,孕酮保留率为46.69%。为了研究鹿茸超临界提取物的体外抗氧化活性,本文通过以卵磷脂为模型的脂质体系,邻二氮菲-Fe2+体系产生的羟基自由基体系,脱氧核糖-铁体系产生的羟基自由基体系三个方面来进行了考察,并与维生素C溶液,鹿茸75 %乙醇和甲醇回流提取物抗氧化活性进行比较。结果表明,三种鹿茸提取物均有一定的抗脂质和自由基氧化的作用,而且呈现一定的剂量效应关系,鹿茸超临界提取物的抗氧化活性明显高于鹿茸回流提取物和维生素C溶液。该研究为探讨鹿茸提取物抗衰老作用机理提供数据基础。尿嘧啶是鹿茸提取物中对单胺氧化酶起抑制作用的主要成分之一。本文利用动态法实验在温度为308.15K~308.15K和压力为15MPa~40MPa范围内测定了尿嘧啶在超临界CO2中的溶解度,考察了温度和压力对溶解度的影响,并对尿嘧啶的溶解度实验数据进行了关联。分别利用经验方程(Gordillo方程、Abolghasem方程),基于稀释溶液理论的M-S-T方程和修饰的Ziger-Eckert方程对实验数据进行了关联,结果表明,这四个关联方程中,五参数Gordillo方程的关联误差较小,AARD为9.8%;而三参数修饰的Ziger-Eckert方程则由于方程中的溶解度参数需要基团贡献法进行估算,而产生较大的关联误差。又分别利用从缔合理论概念出发的Chrastil方程、修正的Chrastil方程以及溶剂—溶质团簇方程对尿嘧啶在超临界CO2中的溶解度进行了关联,结果表明,修正的Chrastil方程的AARD为10.1%,关联结果与Gordillo方程相当而优于Chrastil方程;而溶剂—溶质团簇方程计算结果与实验结果误差较大。本文还通过无因次量纲的引入建立了无因次新缔合方程,此方程具有七个可调参数,关联结果与上述7个方程相比误差最小,AARD为9.2%。上述研究为超临界流体技术的理论研究提供了基础数据。
其他文献
随着地下空间在全球的开发,人们越来越关心如何才能理性的利用地下空间,作为为人们在方向感混淆的地下空间中辨明方向的有效工具,导向标识系统已经成为了该领域中倍受瞩目的
1997年金融危机之后,泰国采取了许多改革措施以提高经济稳定性,恢复金融秩序和刺激贸易发展。泰中自由贸易区的开放,对于泰国政府来说是一项重要的贸易政策,它对泰中双边贸易
开放的世界没有封闭的军营。我国公安边防部队多数驻扎在特区和沿海开放地区,位于改革开放的前沿和对敌斗争的前线,身受两种意识形态和两种生活方式的冲击。部分官兵思想由于
1例70岁女性患者,因急性胰腺炎给予泮托拉唑注射剂(泮托拉唑40mg加入0.9%氯化钠注射液100mL)静脉滴注,在滴入液体约50mL,10min时出现过敏性休克。本文对泮托拉唑致过敏性休克
当今我国高校毕业生面临着越来越大的就业压力,而高校培养出来的学生对国家和社会的依赖性过强,缺乏主动性、开拓性和创新性以及创新精神不足、创业能力弱是导致大学生就业力
桩作为深入土层的深基础,将上部结构荷载通过软弱地层或水传递到深部坚硬的土层中。具有承载力高、稳定性好、沉降量小等特点。本文针对软土地区的单桩基础,采用PLAXIS中的Mo
我国电力体制改革后,供电企业迎来了发展的新机遇。但是与周边发达国家和地区相比,我国供电企业KPI指标均大幅度落后,不能较好适应我国电力工业快速发展的趋势。通过实施精益
中国目前的新药研发要求必须具备GLP实验室的非临床研究结果,而目前国内的GLP建设存在许多问题。突出表现为立法制度不完善,监管部门的监管与服务不到位、临床前实验室的建设
目的探讨肝癌门静脉癌栓的生长特征、可能机制及对食管胃底静脉曲张程度的影响。方法分析98例肝癌门静脉癌栓的影像学变化,观察癌栓的生长部位、生长方式及内镜下食管胃底静
美国药学专业委员会(BPS)认证是以确保公众识别专业的药学服务、建立专业药师认证和再认证、保障大众/消费者安全为目的,以改善患者生命质量为最高宗旨的制度。本文简介了美