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实验目的:
本研究致力于通过环境因素诱导的小鼠模型评估渗透压保护剂对干眼的预防和治疗作用。
实验方法:
本研究采用了智能控制环境系统(Intelligent Controlled EnvironmentalSystem,ICES)创建小鼠干眼模型。实验小鼠随机均分为正常对照组(N)、干眼对照组(E)、甜菜碱干预组(A)、左旋肉碱干预组(B)、赤丁四醇干预组(C)和磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer Solution)干预组(D)。实验分为两个方案,方案1:干预组(A-D)和干眼对照组E放入智能环境控制系统后,干预组按滴双眼,10μl/次,4次/天方式持续给药3周;方案2:干预组(A-D)和干眼对照组E放入智能环境控制系统3周后,干预组(A-D)接受2周的给药,给药方法与方案一一致,直到第5周。本研究通过小鼠第0天,第14天和方案二的第35天角膜荧光素染色(Cornealfluorescein staining,CF),角膜上皮细胞凋亡标志物的荧光染色(TUNEL orcaspase-3 assays),杯状细胞的密度(periodic acid Schiff stain),和炎症因子白介素-17(Interleukin-17),白介素-6(Interleukin-6)和白介素-1β(Interleukin-1β)和肿瘤坏死因子-a(Tumor Necrosis Factor-a)的表达来评估渗透压保护剂对于眼的预防和治疗作用。
实验结果:
在方案1第3周时,与PBS组相比,预防性地使用甜菜碱、左旋肉碱或者赤藓糖醇的小鼠的TNF-a和IL-17表达明显下降。在方案2中,使用渗透压保护剂(甜菜碱、左旋肉碱或者赤藓糖醇)治疗2周后的小鼠的角膜荧光素钠染色与治疗前相比明显下降。并且与PBS组相比,使用左旋肉碱治疗的小鼠荧光素钠染色较少,角膜上皮凋亡细胞数较少,炎症因子白介素-17(Interleukin-17)、白介素-6(Interleukin-6)、白介素-1β(Interleukin-1β)和肿瘤坏死因子-a(TumorNecrosis Factor-a)的表达减弱,同时杯状细胞密度有明显的上升。
实验结论:
局部使用渗透压保护剂(甜菜碱、左旋肉碱或者赤藓糖醇)可以阻碍干眼症的进展。左旋肉碱可以减轻干眼的病情,对于眼症有潜在性的治疗和预防作用。