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目的:虽然本实验室已经证实咪唑啉-2受体(I2R)特异性配体2BFI对小鼠多发性硬化模型实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmuneencephalomyelitis，EAE)的发生有保护作用，但是机制未明。本研究主要观察2BFI整体实验干预下对EAE小鼠中枢和外周的淋巴细胞亚群及相关细胞因子的变化，从而探讨2BFI对EAE干预作用的细胞免疫学机制。 方法与内容: SPF级C57BL/6小鼠:雌性，6-8周龄，体重14～16g。用MOG35-55免疫C57BL/6小鼠制作EAE模型，将小鼠随机分为3组:CFA对照组(CFA-controlgroup)，EAE模型对照(EAE-control group)组，2BFI药物干预组(EAE-2BFI20 mg·kg-1group)。EAE对照组2BFI干预组小鼠用MOG35-55混合CFA制成抗原乳剂皮内注射，CFA对照组以生理盐水代替抗原肽制备抗原乳剂皮内注射，0、48小时腹腔注射PT造模。2BFI干预组于免疫当天开始腹腔注射给药，每天两次，连续14天。CFA对照组和EAE对照组组腹腔注射生理盐水(NS)代替。自免疫当日定为第0天，每日两次观察并记录动物行为学及体重的变化。采用量化评分法，比较不同组别的EAE发病率、潜伏期、症状评分。CFA对照组于20天处死，其他各组动物于发病高峰期处死。取神经组织（腰髓）用多聚甲醛固定，行HE染色观察评价组织炎症病理变化;用流式细胞检测术(FCM)分析中枢神经系统(CNS)及脾脏CD4+T、CD8+T、CD4+TCD25+Treg、B cell及CD39的变化。用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction，RT-pcr)法测定小鼠大脑干扰素-γ(interferon-γ，IFN-γ)、白介素-10(interleukin-10，IL-10)和转化生长因子β(transforming growth factorβ，TGF-β) mRNA的表达。 结果: 1、发病率和行为学变化:EAE对照组小鼠最早发病于免疫后第13天(13dpi)。各组动物EAE诱发率分别为CFA(0/8)，EAE(8/8)，EAE-2BFI(3/8)，提示2BFI干预后EAE诱发率呈下降趋势，有统计学差异（P＜0.05)。2BFI药物干预组的最大临床症状评分平均值(2.88±1.44)较EAE对照组(9.44±0.53)明显降低(P＜0.01)。发病小鼠表现为活动减少、进食减少、体重减轻，先出现尾张力降低、尾巴拖地不能抬起，继而步态异常、后肢无力、瘫痪。CFA对照组小鼠未见发病，体重呈现缓慢上升。 2、病理学改变:CFA对照组小鼠脊髓的组织病理学检查所见H.E.染色正常。EAE对照组小鼠可见脊髓内弥漫性淋巴细胞浸润及大量的炎性病灶，病灶处小血管管周有大量的炎性细胞浸润，成“血管袖套样改变”。2BFI干预组小鼠脑脊髓炎性细胞浸润明显减少。组织损害病理（异常）发生率较EAE对照组降低（P＜0.05），炎症病理评分较EAE对照组降低（P＜0.05)。 3、流式细胞检测淋巴细胞亚群变化的结果:①外周淋巴细胞亚群检测的结果:与CFA对照组相比，EAE对照组和2BFI药物干预组小鼠外周CD4+T、CD8+T均降低，差异有统计学意义（P＜0.05），而EAE对照组与2BFI干预组比较差别不大。而此两组CD4+TCD25+Treg、B cell、CD39较CFA对照组均明显增加（P＜0.05)，其中B cell在2BFI干预组的表达低于EAE对照组，差别有统计学意义（P＜0.05)。 ②中枢各淋巴细胞亚群变化的比较:CFA对照组小鼠中枢未检测到淋巴细胞浸润，2BFI药物干预组小鼠中枢CD4+T、CD8+T、CD4+TCD25+Treg的表达较EAE对照组降低，其中CD4+T、CD4+TCD25+Treg的变化有统计学意义（P＜0.05），B cell、CD39的表达较EAE对照组增加且均有统计学意义（P＜0.05)。 4、RT-PCR检测炎症细胞因子的变化:与CFA对照组比较，EAE对照组小鼠CNS内表达IFN-γmRNA的水平明显增加;与EAE对照组比较，2BFI干预组小鼠CNS内IFN-γmRNA水平均降低(P＜0.05)，而TGF-β、IL-10mRNA水平均升高（P＜0.05)。 结论: 1、本实验中，EAE发病小鼠临床症状与文献报道相似，中枢病理学检测有弥漫性淋巴细胞浸润，FCM检测证实EAE致病过程中有CD4+T、CD8+T浸润，而且B cell、CD39、CD4+TCD25+Treg及相关细胞因子IFN-γ、TGF-β、IL-10均参与调控EAE发病，证明实验所制作的小鼠EAE的模型是成功的，符合要求的。 2、2BFI干预对EAE小鼠具有明显保护作用，主要表现在2BFI干预组小鼠发病率降低，临床症状和病理组织学损伤程度减轻。 3、2BFI能抑制EAE过程中外周活化的T淋巴细胞进入CNS，抑制致病性CD4+T、CD8+T在中枢的表达，上调与EAE恢复相关的B cell、CD39。对EAE的抑制作用与中枢细胞免疫平衡的调整机制有关。 4、2BFI能下调中枢神经系统促炎细胞因子IFN-γ mRNA的表达，上调抑炎性细胞因子TGF-β1和IL-10 mRNA的表达。2BFI对EAE的抑制作用可能与中枢炎症细胞因子免疫平衡的调整机制有关。 5、2BFI参与EAE的中枢及外周细胞和体液免疫的调控过程，可能通过逆转中枢炎症细胞及其相关因子免疫失衡对EAE起保护作用。