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目的:分析胃癌侧群细胞侧群现象、耐药性及其与耐药基因三磷酸腺苷结合盒式蛋白G2之间的关系;比较胃癌侧群细胞与非侧群细胞中一组干细胞相关基因的表达情况。方法:1.选择高分化胃癌细胞株MKN28和低分化胃癌细胞株BGC823,以Hoechst33342/碘化丙啶(PI)荧光染料双染,维拉帕米拮抗对照,应用流式细胞仪荧光激活细胞分选法检测侧群细胞比例并进行分选。2.相差显微镜下分别观察胃癌侧群细胞和非侧群细胞的体外形态并比较分选接种后不同时间点细胞直径差异。3.通过检测不同Hoechst33342染料浓度下胃癌细胞株BGC823和MKN28中侧群细胞比例,比较两者外排染料的能力;应用半定量PCR和Western-blot技术比较ABCG2在两株细胞中的表达差异4.应用含不同浓度5-FU或顺铂的培养基比较两组细胞的药敏差异,并采用半定量PCR和实时荧光定量PCR比较两组细胞中ABCG2的表达差异。5.应用半定量PCR比较胃癌细胞株BGC823分选所得的侧群细胞和非侧群细胞中干细胞相关基因OCT-4、NOTCH、NANOG、BMI-1和已知肿瘤干细胞表面标志物CD133、CD24、CD44的表达差异。结果:1.胃癌细胞株BGC823在分选接种后4h其侧群细胞直径大于非侧群细胞直径(SP=30.03,NSP=28.23,p＜0.05),此差异在24h时消失(SP=53.48,NSP=52.01,p=0.335)。2.胃癌细胞株BGC823在Hoechst33342浓度为5μg/ml时侧群细胞比例为1%,而MKN28在Hoechst33342浓度为4μg/ml、3μg/ml、2μg/ml时均未能出现侧群细胞亚群,直到染料浓度降至1μg/ml时才可检测到0.4%的侧群细胞。半定量PCR及Western-blot的结果显示ABCG2在BGC823中的表达量明显高于MKN28。3.胃癌细胞株BGC823侧群细胞含药培养基中生长结果显示,72h时顺铂高浓度(1μg/ml)组与120h时5-FU高浓度(10μg/ml)组生长情况明显优于非侧群细胞(P＜0.05)。半定量PCR结果显示侧群细胞中ABCG2表达量高于非侧群细胞,实时荧光定量PCR结果显示侧群细胞中ABCG2的表达量为非侧群细胞的8倍。4.半定量PCR结果显示,BGC823侧群细胞中干细胞相关基因OCT-4、NOTCH、NANOG、CD24和CD44的表达量高于非侧群细胞。结论:胃癌细胞株BGC823侧群细胞体外对5-FU和顺铂的耐药性强于非侧群细胞,其耐药能力与ABCG2表达有一定关系。与非侧群细胞相比,胃癌细胞株BGC823侧群细胞高表达OCT-4、NOTCH、NANOG及CD24/CD44等干细胞相关基因。