【摘 要】
：
川贝母为百合科植物川贝母、暗紫贝母、甘肃贝母、砂贝母、太白贝母或瓦布贝母的干燥鳞茎,具有多种功效,如清热润肺、化痰止咳和散结消肿等。2020版药典按性状将其分为“松贝”、“青贝”、“炉贝”和“栽培品”,其中松贝质量高、品质好,在川贝母中价格最高。暗紫贝母是松贝的主要基原植物,暗紫贝母对生长环境要求严格,主要分布于海拔高度2800～4400 m的高寒地区,如青海甘肃南部、四川西北部等。如今暗紫贝母资
论文部分内容阅读
川贝母为百合科植物川贝母、暗紫贝母、甘肃贝母、砂贝母、太白贝母或瓦布贝母的干燥鳞茎,具有多种功效,如清热润肺、化痰止咳和散结消肿等。2020版药典按性状将其分为“松贝”、“青贝”、“炉贝”和“栽培品”,其中松贝质量高、品质好,在川贝母中价格最高。暗紫贝母是松贝的主要基原植物,暗紫贝母对生长环境要求严格,主要分布于海拔高度2800～4400 m的高寒地区,如青海甘肃南部、四川西北部等。如今暗紫贝母资源逐渐枯竭,产量有限,导致市场上松贝混伪品很普遍,对暗紫贝母的次生代谢与生长发育开展研究,可为解决暗紫贝母的资源及药材成分等问题提供理论依据。苯丙氨酸解氨酶（Phenylalanine ammonia-lyase,PAL）催化苯丙氨酸生成反式肉桂酸,是苯丙烷途径的第一个关键酶和限速酶,对植物的生长发育和抗逆防御反应至关重要,研究暗紫贝母PAL,有助于了解暗紫贝母苯丙氨酸解氨酶的结构特征,进而了解暗紫贝母苯丙氨酸解氨酶调控苯丙氨酸代谢的分子机制,对提高贝母次生代谢,提高贝母抗逆性进而提高贝母产量具有重要的意义。本课题基于暗紫贝母转录组数据,成功克隆出暗紫贝母苯丙氨酸解氨酶基因的全长序列,命名为FuPAL。生物信息学分析表明FuPAL全长2169 bp,编码722个氨基酸,FuPAL编码蛋白相对分子质量约为78 k Da,理论等电点为6.07;共含有20种氨基酸,无明显亲疏水性,无跨膜结构域,无信号肽,推测FuPAL不属于分泌蛋白,预测该蛋白定位于细胞质,这一结果通过将FuPAL转入烟草得到验证。分析不同物种的PAL氨基酸序列,发现FuPAL与芦笋PAL的保守区域为GTISSSGDLVPLSYIAG,由SSG氨基酸三联体自身环化转化为活性中心。植物PAL蛋白保守性极高,FuPAL与杂交百合序列相似性可高达92.34%,不同物种间PAL的相似度也可达80%。D32-C722部分的二、三级结构预测显示该蛋白以α-螺旋为主,每个单体由3部分组成,分别为4-甲基-咪唑-5-酮（4-methylidene-imidazole-5-one,MIO）结构域（32D-268T）、核心结构域（269A-535E 657R-722C）和屏蔽结构域（536E-656N）,四个单体聚集形成一个四聚体。定量PCR分析FuPAL基因在暗紫贝母不同部位的表达显示出FuPAL基因表达具有组织特异性,表达差异大,其中在叶中表达量最高,花次之,茎中最低。已有相关研究证实PAL在盐肤木的茎,异叶天南星和黄芩的根中表达量高。推测PAL的组织特异性表达模式与植物中存在其他PAL亚型有关。本课题将FuPAL基因转入大肠杆菌成功表达获得约80 k Da的重组蛋白,与FuPAL蛋白分子量相符。优化FuPAL蛋白表达条件,得出17℃诱导表达最佳,最佳诱导剂浓度为0.2 m M,最佳表达时间为12 h,最佳诱导菌浓度为OD600 0.6。进一步检测发现该蛋白具有催化苯丙氨酸和酪氨酸活性且对苯丙氨酸的亲和力好,催化效率高。随后确定FuPAL蛋白的最适催化温度为50℃,最适p H为7.9,众多金属离子中Zn2+离子对FuPAL活性抑制作用较大,60℃内FuPAL蛋白热稳定性较好。通过分析FuPAL酶结构,发现141F、490E与活性相关,为FuPAL核心位点,对这两个位点进行突变,检测突变蛋白的酶活,发现FuPAL-F141H对苯丙氨酸催化活性降低,对酪氨酸催化活性提高,FuPAL-E490N对苯丙氨酸催化活性降低,无酪氨酸催化活性,证实141F、490E为FuPAL蛋白核心位点,改变两个氨基酸对酶底物选择性、活性有较大影响。
其他文献
柔性棚洞作为一种高效的落石防护结构,在铁路和公路沿线常被用于落石灾害防护。目前尚未相关规范对柔性棚洞抗冲击性能评价进行说明,同时当前对柔性防护网系统的抗冲击性能评价仅是依靠防护能级作为结构性能指标,忽略了落石冲击荷载的多样性和复杂性,据此本文对柔性棚洞抗冲击性能评价开展了深入研究,主要研究成果如下:（1）借鉴被动柔性防护网体系评价方式,对设计柔性棚洞开展了正常工作能级、最大试验能级和极限能级的性能
论文以大跨双层四线铁路钢桁梁斜拉桥为工程背景,运用有限元软件MIDAS CIVIL建立了全桥有限元模型,对该桥进行详细的静力分析和动力分析,并对桥梁的横向约束体系展开分析和优化,以期对相关设计提供参考。论文首先介绍了钢桁梁斜拉桥的发展和特点,概述了斜拉桥的横向约束体系研究现状。针对（62.5+125+425+175+75）m双层四线铁路钢桁梁斜拉桥的设计方案,详细叙述了各构件的模拟方法,建立了基于
餐厨垃圾有机质含量高，含水量高，且易腐败，生产过程中会产生臭气、废水、杂物残渣等。为了有效地进行环境管控，需要从源头进行把控。餐厨垃圾处理过程中各环节做到污水有组织地集中收集，避免跑冒滴漏泄现象发生。处理系统设备选型做到密闭，使臭气得到有组织收集，同时在重点臭气产生区域设计局部抽风设施，以便与后续除臭系统有效衔接。餐厨垃圾处理过程中产生的固体杂物及残渣统一汇至于出渣间。
随着我国地下综合管廊事业的不断发展,大量管廊投入使用,管廊运维管理逐渐成为研究热点。运维风险评价是提升地下综合管廊运维管理效益的重要手段,既有方法以专家评价等静态数据为评价数据,侧重对算法改进以提升评价准确率,未考虑运营过程中管廊状态变化对评价结果的影响,难以反映管廊动态风险变化。此外,现有研究未考虑评价结果的后续应用,基于风险评价的风险管理方法仍需完善。因此为提升管廊运维管理效率,本文提出基于动
我国“十四五”区域发展报告提出,随着城市化的高速发展,经济水平日益提升,应大力推动区域一体化深度发展,把城市群、都市圈作为“十四五”区域经济发展的重要落脚点。而区域一体化的发展离不开综合交通网络的支撑,离不开轨道交通的支持,只有互相影响,互相促进,才能共同健康、稳步的发展。如今,各制式的轨道交通建设逐步扩大,轨道交通设施建设也日益全面,呈现出网络化的良好发展形势。在此基础上,发展区域轨道交通一体化
蛋白质是生命物质的基础,具有免疫、催化、运输、协调、控制生长分化等功能。蛋白质在材料表面的吸附行为,不但是决定材料在体内生物学表现的关键因素、也是理解细胞-材料相互作用研究的理论基础,因此调控材料表面蛋白质的吸附状态已成为研究热点。TiO2具有光催化的特性,在紫外光辐照时,会产生大量活性自由基,有望实现对吸附在表面的蛋白结构进行调控。课题组前期研究发现这些活性物质可以使TiO2表面吸附的蛋白部分解
如今人工智能作为人们关注的热点被广泛研究,在交通领域也有一定应用。生成式深度学习作为一种有创造性的学习方法,对地质灾害实体的模拟研究存在一定意义,文章将对三维空间中地质灾害粒子在自然流动阶段的情况进行讨论和研究。通过对已有研究的总结,由粒子仿真思路,提出一种将地理信息系统（Geographic Information System,GIS）和生成式对抗网络（Generative Adversari
随着我国铁路建设的快速发展以及运营车辆数量的增加,列车的安全运行日益成为关注重点。列车检修是保证列车安全稳定运行环节之一,工人的工作量和压力随着检修车辆数量的增加越来越大,传统的“人检人修”方式已不能满足检修要求,加快以“人检人修”向“机检人修”的改变迫在眉睫。随着机器人应用的迅速推广和人工智能技术的飞速发展,智能检修的列检机器人正在渐渐走入列车检修领域。列检机器人具有高灵活性和适应性,它的应用可
公铁两用桥梁兼并公路交通和铁路交通的功能,能够节省有限的桥位资源,得到越来越广泛的应用。公铁两用桥梁中的列车-汽车-桥梁耦合振动问题研究成果颇多,但对于考虑高速列车运动产生的气动干扰对汽车行驶的影响,此类相关研究较少。由于汽车相对列车而言,重量轻、横向稳定性差,故高速列车产生的气动干扰即列车风荷载对汽车的横向稳定性影响较大。本文首先研制了测试列车风效应的动车试验系统,得到不同汽车在不同列车作用下的
中国铁路有砟轨道路基病害情况较为严峻,严重影响列车安全行驶。而路基病害的传统整治技术沿用至今也逐步暴露出其存在的如施工需开挖道床,封闭线路,施工作业难度大以及整治后的线路耐久性不强等缺点,亟待研发新型路基病害整治技术及相应施工工艺来克服上述技术缺陷。在此背景下,电化学以其施工便捷、无需封闭线路、不影响线路运营以及处理成本低廉等优势而逐步受到关注,本文以铁路有砟轨道路基病害的整治为研究对象,从分析电