抗原诱发的γ-干扰素释放试验在结核性胸膜炎诊断中的应用研究

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研究背景与目的结核性胸膜炎是机体感染了结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis, Mtb)而引起的胸膜变态反应性炎症,多发生于初次感染结核菌后2-12个月,初染者约有14%可发展为结核性胸膜炎。世界上大约有1/3的人,我国约有1/2的人感染过结核菌,结核性胸膜炎的发病率大约为1.25%,据此估算结核性胸膜炎发病人数约为160万,尤其青壮年是它的易感人群,39岁以下的病人占73%。结核性胸膜炎若延误诊断,则可造成胸膜增厚、粘连,严重者可引起肺功能下降而丧失劳动能力。应此,早期诊断并给予早期治疗是非常必要的。目前结核性胸膜炎的诊断主要依靠PPD皮内变态反应、胸腔积液的细菌学检查和胸膜病理学检查,PPD皮内变态反应与卡介苗接种、结核菌潜伏感染及非结核分枝杆菌感染不易区分,胸腔积液的细菌学检查在胸水中检查的阳性率极低,胸膜病理学检查有创伤性,患者依从性差。因此,目前急需要研究一些新的检查方法以提高对结核性胸膜炎的诊断水平。进入21世纪来,随着基因组学和免疫学研究的进一步深入,出现了在体外刺激T淋巴细胞分泌γ干扰素测定的方法。它的原理是:首先使结核杆菌抗原接触T淋巴细胞,然后再次使结核杆菌抗原接触致敏的T淋巴细胞,这些致敏的淋巴细胞则会释放出大量的γ-干扰素,较高的γ-干扰素释放水平,提示患者感染了结核分枝杆菌,这就是γ干扰素释放试验(Interferon-gamma Release Assay,IGRA),刺激T淋巴细胞产生γ干扰素的抗原有时易与机体接种过卡介苗和感染了非分支杆菌所产生的高的Y干扰素水平所相混淆,因此我们必须找到这样一种抗原,它是结核杆菌所特有的,而其他非结核分枝杆菌缺失,这样的试验结果才能在结核病中有较高的的诊断意义。近两年研究发现的早期分泌抗原靶6000(early secreting antigenic target-6,ESAT-6)就是这样的抗原,它可成功地避开接种卡介苗和非结核分枝杆菌的干扰,而使它的特异性大大提高。目前,大多数的研究是采集患者的血清来进行抗原诱发的γ干扰素释放试验,我们试图通过采集结核性胸膜炎患者的胸水进行抗原诱发的γ干扰素释放试验(IGRA),观察ESAT-6对结核性胸膜炎的诊断价值。方法研究对象分为两组:结核性胸膜炎组与恶性胸腔积液组。应用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)的方法检测两组患者血清及胸水中γ干扰素基础值水平及经ESAT-6抗原刺激后γ干扰素释放水平,并对数据进行对比分析,判断Y干扰素基础值及经ESAT-6抗原刺激后γ干扰素释放水平对结核性胸膜炎的诊断价值。结果1结核性胸膜炎组胸水中的Y干扰素基础值和经ESAT-6抗原刺激后Y干扰素释放水平均高于血中的γ干扰素基础值及经ESAT-6抗原刺激后γ干扰素释放水平,P<0.01,具有统计学意义。2结核性胸膜炎组胸水中的Y干扰素基础值和经ESAT-6抗原刺激后γ干扰素释放水平均高于恶性胸腔积液组,P<0.05,具有统计学意义。3结核性胸膜炎组血中检测γ干扰素基础值及经ESAT-6抗原刺激后γ干扰素释放水平均高于恶性胸腔积液组,但P>0.05,差异无显著性。结论1结核高感染率的背景下,血中γ干扰素释放试验(IGRA)对于鉴别胸腔积液是肿瘤还是结核意义不大。2在胸水中检测γ干扰素释放试验(IGRA)对结核性胸膜炎诊断的方法简变,特异性、灵敏性高,在临床上值得推广使用。
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