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为探讨糖皮质激素对肉仔鸡骨骼肌葡萄糖转运的影响,本研究从活体入手,以外源导入糖皮质激素的方法,观察肉仔鸡骨骼肌内葡萄糖转运载体的种类和葡萄糖转运载体的变化情况;同时,以体外培养的成肌细胞为研究模型,分析引起葡萄糖转运改变的因素并测定葡萄糖的转运速率,为肉仔鸡骨骼肌葡萄糖代谢紊乱和胰岛素抵抗的发生提供一定的理论依据。选取0日龄体重相近的Arbor Acres雄性肉鸡72只,随机分为三个处理:地塞米松组(DEX)、对照组(NC)和采食量配对组(PF)。7-13日龄,各组早8:00分别腹部皮下注射DEX或生理盐水2mg/Kg。对照组与地塞米松组自由采食饮水,采食量配对组饲喂DEX组前一天的采食量。13日龄晚8:00各处理空腹12小时,自由饮水后取样。翅静脉采血,分离血浆,冷冻保存;臀股二头肌(M . biceps femoris , BF)、胸大肌(M . pectoralis major, PM)各2g左右,液氮速冻,-80℃贮存。取全部胸腿肌称重,测定胸腿肌指数。结果表明,生产性能方面,处理7天后体重显著降低,料重比显著升高,表明糖皮质激素处理降低了肉仔鸡的生产性能,胸腿肌指数变化不显著;血液生化指标方面,处理7天后血浆尿酸、胰岛素和血糖含量显著上升;在对基因mRNA的检测中,肉仔鸡骨骼肌中发现GLUT1、GLUT3、GLUT8、GLUT11与GLUT12蛋白的存在,同时并未发现GLUT4类似蛋白的存在。试验二,成肌细胞正常培养,72h后去除胎牛血清,无血清培养4h。(1)随机分为4组:对照组(高糖无血清)、LY294002组(50uM LY294002)、Rapamycin组(5nM Rapamycin)、地塞米松组(高糖无血清),1h后,后三组添加200nM DEX,3h后测定葡萄糖转运速率。(2)随机分为4组:对照组、胰岛素组(高糖无血清)、RU486组(2uM RU486)、胰岛素和地塞米松组(高糖无血清),1h后,后三组分别添加0.1U/ml INS或200nM DEX+0.1U/ml INS。3h后测定葡萄糖转运速率。结果表明,(1)糖皮质激素显著降低了2-DG的转运速率,PI3K及mTOR被阻断后缓解了该抑制作用。(2)胰岛素促进了2-DG的摄取,加入地塞米松后消除了胰岛素对2-DG摄取的促进作用,但差异并不显著。试验三,成肌细胞于DMEM高糖培养液中添加10%胎牛血清,37℃,5% CO2正常培养,72h后去除胎牛血清,无血清培养4h。(1)随机分为5组:对照组,后四组分别添加0.2、1、5、25 U/ml的INS。处理3h,提取RNA。(2)随机分为4组:对照组、地塞米松组(200nM DEX)、胰岛素组(0.1U/ml INS);胰岛素与地塞米松组(200nM DEX,0.1U/ml INS)。处理12h,提取RNA。结果表明,(1)随着胰岛素浓度的升高,GLUT1,IR mRNA的相对表达量皆存在升高又降低的趋势,0.2 U/ml时表达量最高,随后降低(2)只有GLUT1的mRNA水平受到胰岛素处理后显著升高,表现出胰岛素敏感的特性。揭示GLUT1在肉仔鸡骨骼肌胰岛素诱导的葡萄糖转运的重要作用。试验四,成肌细胞正常培养,72h后去除胎牛血清,无血清培养4h。(1)随机分为2组:高糖组(4.5 g/L GLU)、对照组(1 g/L GLU)。处理12h,提取RNA。(2)随机分为2组:无糖组(0 g/L GLU),对照组(1 g/L GLU)。处理12h,提取RNA。结果表明,(1)高糖处理显著升高了GLUT1、GLUT3的mRNA水平。对其它几种转运载体mRNA水平无显著影响。(2)无糖处理对所有五个蛋白的mRNA水平无显著影响,其中GLUT11与GLUT12表达量非常低。由以上结果显示GLUT1、GLUT3在肉仔鸡骨骼肌中可能受到血糖水平的调控。综上所述,肉仔鸡骨骼肌中GLUT1所表现的胰岛素敏感的特性及在糖皮质激素处理下含量的降低,可能在由糖皮质激素处理所导致的肉仔鸡葡萄糖代谢的紊乱中起到了重要作用。