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前言 动脉粥样硬化性脑梗死（ACI）与动脉粥样硬化（As）有着密切的关系，氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）在As发生发展中扮演着关键角色。低密度脂蛋白（LDL）氧化修饰促进了LDL累积于巨噬细胞并促进其转化为泡沫细胞-这是As初始步骤，ox-LDL抑制内皮细胞的一氧化氮合酶（eNOS），减少一氧化氮的合成。由于血浆中有强大的抗氧化能力，LDL氧化主要发生在动脉血管内膜下。体外采用Cu2+诱导LDL检测234nm生成共轭二烯（conjugated dienes CD）的量间接反应LDL氧化易感性。一些学者还对冠心病、糖尿病、家族性高胆固醇血症与LDL氧化易感性进行研究，但关于LDL氧化易感性与脑梗死关系报道甚少。本文对ACI组和正常对照组LDL氧化易感性，血浆总抗氧化能力（total antioxidant status TAS）进行分析，探讨ACI组与正常对照组间这二者之间的关系。 材料和方法 一、研究对象 ACI组为64例ACI患者，男45例，女19例，均为我院2001年1月—2001年12月入院患者，符合第四届全国脑血管会议制定的诊断标准，经头CT和／或MRI诊断证实，排除心、肝、胆、胰、肾等脏器的疾病及糖尿病，年龄31—79岁，平均年龄59.39±12.08岁。对照组为健康体检者42例，男27例，女15例，年龄40—77岁，平均年龄51.66±9.43岁，以上两组三个月内均未服用抗氧化药物及降脂类药物，且都无烟、酒嗜好。 二、实验方法 1．标本的采集和制备 所有受试对象空腹12h晨起后，静脉采血sml，sml注人含有400iii EDTA·N％门．og／L)的．抗凝管中，4T，2000 x x，离心10min，分高血浆，－80T保存待测，另3ml分离血清，置一80t待测NO及脂类。 2．低密度脂蛋白（LDL）的分离 采用密度梯度超速离心法分离血浆 LDL。取0．gml血浆置于聚碳酸酯纤维离心管中，用漠化钾（KBr）调整其密度为1．400阿L，在其上加人 1．100K叭的KBr溶液 1·sml，再加人 1．006VL的盐水（含0．01％EDTA乃．3rnl。天平配平后，放人RP83T固定角转子中，在日立 SCP 85H型超速离心机离心／5℃，AVG 278940x gN5000rpm），超速离心 5．sh。超速离心后，在管子中下部可见一条密集的淡黄色的条带，即为要分离的LDL。用10ml一次性注射器轻轻插在淡黄色条带下缘，缓缓吸出LDL约Znd，放人栅标记的离心管中。分离好的 LDL置于3L PH为 7．4的0．olM磷酸盐缓冲液《PBS八‘含0．16mol Na0，10…EDTA)中，4℃避光透析24h，浓缩LDL。所分离的pL经琼脂糖凝胶电泳证实为一条带。 3．LDL氧化易感性的测定 采用体外 on卜诱导 wt检测 s’nzn生成共轭一烯（conusated diones CD）的量间接反应LDL氧化易感性。将稀释好的 LDL溶液（LDL蛋白浓度为0．仍令L）加人比色杯中，再加人CU礼·ZHp新鲜配制的溶液，使其终浓度达10 IJ．xloirlJ．xlorL，置人带恒温装置的UV－160紫外一可见分光光度计中，37℃恒温监测234urn处的光吸光度变化，每隔Zndn仪器自动记录一次吸光度值，记录3h。然后绘制时间一吸光度变化曲线，曲线可分为三个连续相＊)延迟相，p)上升相，侈)下降相。用以下三个指标描述LDL的氧化易感性＊)延迟时间（k上回归，Mn＊上升相斜率与初始服水平 ·二·相交叉点处对应时间；p）最大氧化速率（mwal rae，rnml．dn－‘s－’LDL蛋白）通过曲线上升相斜率可求得 ； 3北D最大生成量（CD mallmal Production，mrnirg LDL蛋白）通过吸光度曲线“最大值计算出峰值CD生成量与初始CD量的差。 4．血浆总抗氧化能力（Total anhotidant status，TAS）测定 血浆总抗氧化能力采用比色法测定，其基本原理 ABwiK．2；一胜no－i－3－e山伯e咖i旺of．e sulPhonate)和过氧化物及H。O。孵育，产生 ABTh你离子，产生稳定的蓝绿色，在600urn处有最大光吸收。血浆中的抗氧化物可抑制上述反应，抑制的程度与TAS含量成正比。采用终点法在 7 170生化自动分析仪上测定 TAS含量。 5．一氧化氮州itri otide，NO)测定 本文采用硝酸还原酶法测定NO。硝酸还原酶法特异地将NO；还原成NOi，与显色剂反应生成有色化合物，颜色的深浅与NO浓度高低成正比。 6．血脂及载脂蛋白的测定 采用商品化的试剂盒测定血清总胆固醇（TCh甘油三酯（T＊低密度脂蛋白胆固醇（LDL－CX高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C），APOA二，APOB。 7．统计学方法 所有数据以均数上标准差k。S）表示，数据处理采用t检验和相关分析。 结 果 二．脑梗死组与对照组LDL氧化动力学特性比较＊脑梗死组的延迟时间较对照组明显缩短阳8．8土8．Ivs 8＊5士6．sminp＜0．of），而 CD最大氧化速率及 CD最大生成量显酿于对照组＊D最大氧化速率：3·03 t 0．47 vs．70。0．25 nunol．rum一丁‘ ·3·LDL蛋白；CD最大生成量：376．94。28．04 VS 231．14 i 39．35rnxnol／g LDL蛋白，P＜0．01）。 2．脑