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目的研究细胞窖(Caveolae)调节蛋白血清剥夺反应相关蛋白(Serum Deprivation Response Protein,SDPR)m RNA和蛋白在肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)组织中的表达情况;研究另外两种细胞窖相关蛋白:蛋白聚合酶Ⅰ转录释放因子(PolymeraseⅠand Transcript Release Factor,PTRF)m RNA和窖蛋白-1(Caveolin-1,Cav-1)m RNA在HCC组织中的表达情况;分析SDPR、PTRF和Cav-1在HCC组织表达的相关性,以及与患者临床病理资料的相关性,探讨Caveolae异常对HCC发生发展的可能影响。方法1、基于转录组测序(RNA Sequencing,RNA-Seq)技术对9例HCC患者样本行测序,筛选与HCC相关的差异表达基因(Differentially Expressed Genes,DEGs),鉴定出在9例HCC组织中表达均明显下调的差异表达基因SDPR。这部分内容为课题组前期研究工作。2、采用实时荧光定量PCR(Real-time Quantitative Polymerase Chain Reaction,RT-q PCR)验证80例HCC组织和配对癌旁组织中SDPR m RNA的表达情况,同时检测PTRF m RNA和Cav-1 m RNA的表达情况。3、采用免疫组织化学技术(Immunohistochemistry,IHC)检测80例HCC组织和配对癌旁组织中SDPR蛋白的表达情况。结果1、RNA-Seq检出HCC组织和配对癌旁组织中组间差异表达基因1943个,其中HCC组织中上调的690个,下调的1253个。差异表达基因富集在各类代谢过程、细胞周期和信号通路中,其中与肿瘤关系比较密切的包括细胞周期和P53信号通路。SDPR m RNA在HCC组织和配对癌旁组织的表达量分别为3.39(1.57-6.61)和12.35(10.02-14.43),差别具统计学意义(P<0.05)。2、RT-q PCR验证SDPR m RNA在HCC组织的表达,在80例HCC组织SDPR m RNA低表达56例,高表达24例,与配对癌旁组织相比较,差别具统计学意义(P<0.05)。3、IHC检测SDPR蛋白在HCC组织的表达,在80例HCC组织SDPR蛋白阴性66例,阳性14例,与配对癌旁组织相比较,差别具统计学意义(P<0.05)。4、RT-q PCR检测PTRF m RNA和Cav-1 m RNA在HCC组织的表达。与配对癌旁组织相比较,在80例HCC组织PTRF m RNA低表达53例,高表达27例,差别具统计学意义(P<0.05);与配对癌旁组织相比较,Cav-1 m RNA低表达35例,高表达45例,差别无统计学意义(P>0.05)。5、相关性分析显示SDPR m RNA、PTRF m RNA和Cav-1 m RNA三者的表达具明显相关(P<0.05);SDPR m RNA、PTRF m RNA表达和血清胆碱酯酶(Cholinesterase,CHE)具明显相关(P<0.05)。结论1、与癌旁组织相比,在HCC组织SDPR m RNA和蛋白表达均明显下调。2、与癌旁组织相比,在HCC组织PTRF m RNA表达明显下调。3、与癌旁组织相比,在HCC组织Cav-1 m RNA表达无差异。3、SDPR、PTRF和Cav-1在HCC组织中的表达具明显正相关,可能通过影响细胞窖结构和功能的方式,参与HCC的发生发展的过程。4、HCC患者血清胆碱酯酶活性明显降低,且和癌组织SDPR、PTRF的表达具明显正相关,提示细胞窖结构和功能和胆碱能神经信号系统的异常可能共同参与了HCC疾病发生发展的过程。