【摘 要】
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目的：研究P2Y嘌呤受体在小胶质细胞和成神经细胞瘤细胞中对缺血诱导因子1（hypoxia-inducible factor-1，HIF-1）的作用。 方法： 1.细胞培养，BV-2小鼠小胶质细胞和Neuro2a小鼠成
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目的：研究P2Y嘌呤受体在小胶质细胞和成神经细胞瘤细胞中对缺血诱导因子1（hypoxia-inducible factor-1，HIF-1）的作用。 方法： 1.细胞培养，BV-2小鼠小胶质细胞和Neuro2a小鼠成神经细胞瘤细胞在加有10％牛胎血清的DMEM细胞培养液中，37℃，5%二氧化碳潮湿的培养箱中培养。 2.应用RT-PCR技术、RNA干扰技术、蛋白印迹技术和荧光素酶报告基因技术检测HIF-1及其应答基因mRNA转录和蛋白表达，并利用不同蛋白激酶特异性抑制剂，观察HIF-1表达与相关信息传导通路之间的关系，采用MTT法和3H-TdR掺入法检测小鼠成神经细胞瘤细胞和小神经胶质细胞中DNA合成和细胞增殖。 结果： 1．UTP时间依赖性的激活HIF-1蛋白表达，但对HIF-1α mRNA转录没有影响，说明其调控是在转录后和/或翻译水平上进行的。 2．UTP时间依赖性的激活HIF-1应答基因VEGF和GLUT1 mRNA转录。 3．HIF-1表达上调与PLC/PKC/[Ca2+]、PI3K/AKT/mTOR和ERK1/2信息通路的激活有关。 4．PI3K/AKT/mTOR、ERK1/2信息通路的激活与EGFR转录激活有关，后者激活又涉及c-Src和NADPH氧化酶信息通路。 5．HIF-1在UTP诱导的小鼠成神经细胞瘤细胞和小神经胶质细胞中DNA合成与细胞增殖中起重要作用。 结论：在小胶质细胞和成神经细胞瘤细胞中，UTP通过PLC/PKC/Ca2+和PI3-kinase/Akt传导通路增加HIF-1蛋白质的合成并激活其活性，而后通过HIF-1的活性促进细胞增殖。
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