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在哺乳动物卵巢上,只有极少数卵泡能充分发育成熟并排卵,而大量的卵泡在发育到有腔卵泡前发生闭锁退化。从某种意义上说,这是对遗传资源的极大浪费。研究和利用这部分资源,具有重要的理论和现实意义。近年来;一氧化氮（nitric oxide,NO）作为一种信号分子在哺乳动物生殖系统中的重要作用逐渐被认识,其中与卵母细胞的生长发育及其调控密切相关。但NO对腔前卵泡生长发育的影响却很少有报道。本论文用体外培养猪腔前卵泡的方法,分别用NO供体硝普钠（sodiumnitroprusside,SNP）（Ommol/L、0.001 mmol/L、0.01mmol/L、0.1 mmol/L和1 mmol/L）,一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）底物精氨酸（L-Arg,600μmol/L）、NOS抑制剂硝基精氨酸（Nw-Nitro-L-arginine,L-NNA）（1mmol/L）或硝基精氨酸甲基酯（Nw-Nitro-L-arginine methyl ester,L-NAME）（1mmol/L）处理,观察其存活、基底膜完整性、形态、成腔及直径变化等情况,并研究培养后卵泡中卵丘卵母细胞复合体（cumulus oocyte complex,COC）的回收、卵母细胞的发育和雌二醇（E2）及孕酮（P）分泌情况。结果表明,①体外培养的腔前卵泡直径逐渐增加,但SNP各处理组卵泡在培养过程中相互之间直径变化差异不显著（P＞0.05）;L-ARG+L-NNA组卵泡直径在培养第4天显著高于L-NNA、L-NAME和L-ARG+L-NAME组（275μm vs258μm,254μm,258μm,P＜0.05）。第6天时的卵泡直径的变化与第4天相似,并且L-ARG+L-NNA组显著高于两种抑制剂组（P＜0.05）;②体外培养后,各处理组间卵泡存活率存在差异,1mmol/L SNP组卵泡存活率显著低于0.001mmol/L SNP组（61.6%vs81.5%,P＜0.05）;培养第2天,对照组、L-ARG组和L-ARG+L-NNA组卵泡存活率显著高于L-NNA、L-NAME和L-ARG+L-NAME组（P＜0.05）;L-ARG、L-ARG+L-NNA组卵泡存活率在培养第4天显著高于L-NNA和L-ARG+L-NAME组（P＜0.05）,培养第6天对照组、L-ARG和L-ARG+L-NNA组卵泡存活率显著高于L-NNA和L-NAME组（P＜0.05）,且L-ARG+L-NAME组卵泡存活率显著高于L-NAME组（66.6%vs 51.9%,P＜0.05）;③在体外培养后期,1mmol/L SNP组的基底膜完整性显著低于0.001mmol/L SNP组和对照组（第4天:61.8%vs90.9%,85.5%,P＜0.05;第6天:55.2%vs87.6%,77.1%,P＜0.05）;L-NAME组卵泡基底膜完整率在培养第4天显著低于对照组、L-ARG组、L-ARG+L-NNA组和L-ARG+L-NAME组（68.7%vs82.3%,81.1%,84.9%,81.8%,P＜0.05）;L-ARG组在培养第6天显著高于L-NNA组、L-NAME组、L-ARG+L-NNA组和L-ARG+L-NAME组（P＜0.05）;④在培养后期,1mmol/L SNP组卵泡形态正常率显著低于对照组和0.001mmol/L SNP组（第4天:54.9%vs73.8%,71.8%,P＜0.05:第6天:45.2%vs60.6%,68.8%,P＜0.05）;此外,0.1 mmol/L SNP组在培养第6天显著低于0.001 mmol/L SNP组（P＜0.05）;L-NAME组形态正常率在培养前4天显著低于对照组、L-ARG组和L-ARG+L-NAME组（P＜0.05）;两种抑制剂组在培养第6天与其它各处理组相比都显著降低了卵泡形态正常率（P＜0.05）;与对照组相比,L-Arg可以显著逆转L-NNA和L-NAME对卵泡形态正常率的抑制作用（P＜0.05）;⑤体外培养4天时,SNP处理组中以0.001mmol/L成腔率（50%）最高,第6天时0.001mmol/LSNP组成腔率显著高于0.1和1 mmol/L SNP组（73.1%vs50.0%,47.6%,P＜0.05）;L-ARG组与对照组在培养第4天显著高于L-NNA、L-NAME和L-ARG+L-NAME组（27.5%,28.5%vs12.6%,13.2%,16.8%,P＜0.05）;另外,L-ARG组与对照组在培养末期均显著高于具有抑制剂组的,无论是否存在L-Arg（P＜0.05）;⑥培养结束后卵泡中的卵母细胞,其形态正常率,1mmol/L SNP组显著低于0.001 mmol/L SNP组（P＜0.05）,其余各组间差异不显著（P＞0.05）,但以0.001 mmol/L SNP组卵母细胞正常率最高,为71.21%;与L-ARG组相比,L-NNA和L-NAME组显著降低了卵母细胞形态正常率（58.4%vs33.5%,35.6%,P＜0.05）;此外,L-Arg可以显著逆转L-NNA的抑制作用（P＜0.05）,但只能部分逆转L-NAME抑制卵母细胞正常率的作用（P＞0.05）;培养结束后,SNP各处理组COC回收率分别为22.9%、37.3%、25.6%、20.7%和19.4%,0.001 mmol/L SNP组COC回收率显著高于包括对照组的其余各处理组（P＜0.05）;与对照组相比,L-Arg可以显著逆转L-NNA和L-NAME对COC回收率的抑制（21.7%vs11.9%,8.9%,P＜0.05）。⑦对照组E2水平在培养第4天时显著高于各SNP处理组（P＜0.05）;第6天除0.001mmol/L SNP与对照组没有显著差异外（P＞0.05）,对照组显著高于其它各组（P＜0.05）,且随SNP浓度的升高E2浓度表现下降;1mmol/L SNP组P浓度在培养第4天显著高于对照组、0.001和0.01mmol/L SNP组（P＜0.05）;第6天时,对照组P浓度显著低于各SNP处理组（P＜0.05）,并随着SNP浓度的升高P水平呈剂量依赖性提高。以上结果表明,猪腔前卵泡生长发育过程中,NO参与了卵泡生长、基底膜完整性和形态正常的维持、腔的形成、卵母细胞正常发育以及性腺类固醇激素的分泌调控。