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背景与目的：经自然孔道内镜外科(Natural Orifice Translumenal Endoscopic Surgery, NOTES)是指经人体自然孔道(口、结肠、阴道及膀胱等)而无皮肤切口应用软镜对腹腔内脏器进行的诊断及治疗。其较传统腹腔镜手术具有无腹壁手术切口、术后疼痛少、住院时间更短、美容效果更好等潜在优势。NOTES被认为是微创外科发展的又一里程碑,是目前消化内科与普通外科医生研究的热点。在欧美等发达国家,对NOTES的实验室及临床研究工作已取得很大成绩。在我国,由于研究工作起步较晚,目前仅有少数几家医院开展此项研究而且多局限于实验室工作。本研究的目的是通过动物实验研究初步探讨NOTES技术的可行性及安全性,分析、总结NOTES技术的操作要点、面临的问题及其并发症：分析NOTES围手术期实验动物心肺功能及免疫应激指标的变化情况并与传统腹腔镜手术进行对照研究以及初步探讨NOTES操作时相关并发症的预防策略。方法：选用五指山小型猪30只,体重20-25kg。对实验动物行静脉复合麻醉,气管插管及呼吸机辅助呼吸后,采用双孔道内镜进入胃肠道或阴道,选取胃窦体交界前壁小弯侧、距肛门15cm-20cm结肠后壁系膜对侧或阴道后穹窿位置造口,建立入路。内镜经造口进入腹腔后,应用双孔道内镜或在经脐单孔腹腔镜辅助下行腹腔内探查或/和胆囊切除。研究有三个部分组成：实验一选用五指山小型猪20只,按随机原则分为两组,每组10只动物,即单纯经胃途径NOTES胆囊切除术组(A组)和经胃途径NOTES联合经脐单孔腹腔镜胆囊切除术组(B组)。对两组动物分别行胆囊切除术,观察、比较、分析两种术式的可行性、有效性和安全性；实验二将实验一中两组实验动物分别按照随机原则再分为两组,共分为四组,每组5只实验动物,即A1、A2和B1、B2组。其中A1及B1组在行胆囊切除术前以生理盐水充分冲洗胃腔进行消毒,A2及B2组不行任何消毒处理。对实验中所有动物于术前、手术结束时分别取胃腔、腹腔冲洗液进行细菌培养,分析术前生理盐水冲洗是否会减少术后腹腔感染的发生。并对四组实验动物术后炎症反应情况进行观察、分析；实验三选用五指山小型猪10只,按随机原则分为两组,每组5只,即行NOTES腹腔探查术组(N组)和行腹腔镜腹腔探查术组(F组),监测术中、术后研究对象心肺功能(血压、心率及动脉血气)、应激反应指标(白介素-1及肿瘤坏死因子)的变化,将两种术式对实验动物围手术期的影响加以比较分析,观察NOTES对机体的创伤；结果：实验一：共成功完成胆囊切除术12例次,成功率为60.0%(12/20);其中单纯NOTES经胃途径(A组)成功5例次,成功率为50.0%(5/10)；联合途径(B组)成功7例次,成功率为70.0%(7/10)。存活实验11例次,急性实验9例次,其中A组存活4例次,B组存活7例次；实验二：共19只动物57份标本完成细菌培养(A2组中1份标本24小时内未能送检)。四组实验动物术前胃内标本液(标本A)及术前腹腔冲洗液(标本B)细菌培养结果无明显差异；虽四组动物术后腹腔冲洗液细菌种类无明显差异,均以大肠埃希菌、肺炎克雷柏菌为主,但A1、B1组中细菌生长数目明显少于A2、B2组,而且前两组中有细菌生长标本的总例数少于后两组(30.0%vs60.0%)。同时在存活动物实验中,A1、B1组术后第1及3天平均WBC水平明显低于后两组；实验三：10只动物均成功行NOTES或腹腔镜探查术,术后均成活超过7天。两组动物间术前、术中及术后在平均心率、平均动脉血压变化上无明显区别；两组动物术后24及72小时平均IL1-β及TNF-a水平均明显高于术前水平。两组间在术后平均白介素1-B水平除术后第72小时上无明显差异,N组术后24及72小时肿瘤坏死因子明显高于F组。术后第7天两组动物平均IL1-β及TNF-a水平已基本恢复术前水平。结论：①采用现有内镜设备,单纯NOTES途径可以完成腹腔内脏器的探查,但完成脏器切除术难度较大、成功率较低；②采用联合经脐腹腔镜辅助行NOTES胆囊切除术,可以提高自然管壁造口安全性,改善腹腔内空间定位,显著降低操作难度并提高操作成功率,具有一定的可行性；③经钛钉直接夹闭自然管壁造口的成功率较高,但有一定失败率,闭口失败后容易因造口漏而导致腹膜炎等严重并发症；④术前生理盐水冲洗胃腔是有效降低术后感染及减少细菌移位的有效方法之一;⑤与传统腹腔镜探查术相比较,由于目前内镜建立气腹压力波动较大,经胃途径NOTES腹腔探查术并没有降低对实验动物的创伤,但并没有增加实验动物围手术期并发症发生及死亡率；⑥目前内镜器械及设备完成腹腔内脏器的切除难度很大,为充分发挥NOTES技术优势,有待于发明更多先进的软镜设备及器械。