论文部分内容阅读
花脸香蘑味道鲜美，色泽美丽，气味浓香，是一种品质优良的食用菌，为开发利用这一资源，对花脸香蘑生物学特性进行了研究，结果表明:菌丝体生长最佳碳源为玉米面;最佳氮源为黄豆粉;分别加入KH2PO4和K2HPO4时菌丝体生长均较好，但同时加入MgSO40.05％，KH2PO40.1％菌丝体生长情况最好;碳氮比为20/1时，菌丝体达到最佳生长状态;不添加维生素时菌丝体生长情况最佳;在pH7、pH8、pH9时菌丝体生长状态较好;最适光质条件为自然光;光量试验结果显示，黑暗条件下菌丝体生长状态最佳。经正交试验结果确定菌丝体生长的最佳固体培养基为:蔗糖20g、豆粉6g、MgSO40.5g，KH2PO41g，蒸馏水1000ml。
为了提高花脸香蘑菌丝体发酵的产糖率，采用热水浸提法，以发酵全液粗多糖得率作为考核指标，通过单因素试验和正交试验，对花脸香蘑(Lepistasordida(Fr.)Sing.)菌丝体多糖发酵条件进行优化。结果表明，花脸香蘑菌丝体多糖发酵的最佳条件为:蔗糖20g、蛋白胨4g、硫酸镁0.5g、磷酸二氢钾2g，蒸馏水1000ml。
通过单因素试验和正交试验，研究了提取温度、醇沉酒精浓度、pH、提取次数对多糖提取量的影响。单因素试验结果表明:最佳提取温度、酒精终浓度、pH、提取次数依次为100℃、80％、12、3次。正交试验结果显示，花脸香蘑发酵液多糖的最佳提取条件为:温度100℃、2次、pH12、酒精浓度70‰花脸香蘑发酵液多糖提取量达4mg/ml。
发酵液经热水浸提后，醇沉得粗提物LSC，粗提物含有多糖、蛋白质、色素、小分子等多种物质，为了得到较为纯化的多糖样品，对粗提物进行初步纯化和分级纯化。初步纯化过程包括sevag法除蛋白，双氧水法除色素，利用透析袋透析除小分物质，样品冷冻干燥，最终得到样品LSP。利用葡聚糖凝胶G-100柱层析，对样品LSP进行分级纯化，将多糖高峰部分分别合并得LSM1和LSM2。在多糖的提取、分离纯化过程中共得四种样品:粗多糖LSC，经初步分离纯化的多糖LSP，纯多糖LSM1和LSM2。LSC、LSP、LSM1、LSM2在抗肿瘤试验中做供试样品。
关于花脸香蘑多糖单糖组分及分子量的研究发现，花脸香蘑多糖LSM1含有甘露糖、盐酸氨基葡萄糖、葡萄糖、岩藻糖、木糖5种单糖，摩尔比为1.00∶0.21∶2.24∶0.48∶0.11，据重均分子量确定其分子量分布在5697.59-1105945.03之间。
LSM2由甘露糖、盐酸氨基葡萄糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、岩藻糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖8种单糖组成，其摩尔比为1.000∶0.017∶0.021∶3.552∶0.114∶0.030∶0.053∶0.151，以重均分子量为依据判定其分子量分布在2148.27-14165.97。
红外光谱测定结果显示，LSM1和LSM2均为吡喃糖。
核磁共振图谱分析结果显示，LSM1糖苷键类型有α构型及β构型，连接方式主要为1，4-糖苷键。LSM2糖苷键以α构型为主，包含β构型，连接方式主要为1，4-糖苷键。
对花脸香蘑多糖进行体内抗肿瘤试验，研究结果显示，花脸香蘑多糖样品具有不同程度的抑瘤效果，粗多糖中剂量组、初步纯化后的多糖LSP高剂量组、中剂量组，抑瘤效果较好，抑瘤率依次为47.8％、65％、57％。