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生物体由蛋白质、DNA、RNA等生物大分子组成,这些生物大分子在生物体各种调控通路中相辅相成,共同维持生命体的正常运转。它们主要通过DNA与RNA、蛋白质与DNA、蛋白质与RNA、蛋白质与蛋白质相互作用进行生物信息的传递,最终完成生物体的一系列活动。其中,秀丽隐杆线虫MEX-3蛋白质的KH结构域与拟南芥PUF类蛋白质APUM5都是通过与mRNA的3’不翻译区相互作用,进而激活或抑制mRNA的翻译过程,调控整个生命进程。而斑马鱼精氨酸甲基转移酶PRMT9通过修饰某些蛋白质精氨酸的甲基化,使甲基化的蛋白质某种功能被激活或被抑制,进而影响生物体一系列下游调控过程。MEX-3蛋白质在秀丽隐杆线虫的P granule中被发现,具有串联的KH结构域,它通过结合RNA调控生殖细胞系全能干细胞的更新及早期胚胎发生时期细胞的分化。PUF类蛋白质存在于多种生物体中,拟南芥APUM5通过其PUF结构域结合病毒基因组从而实现自我防御的功能。而精氨酸甲基转移酶PRMT9通过甲基化剪接因子参与选择性剪接的相关调控。通过研究蛋白质与RNA、蛋白质与蛋白质作用的结构基础,能帮助我们进一步的了解生物体中各种调控过程的分子机制。我们主要利用大肠杆菌体外表达了秀丽隐杆线虫MEX-3 KH结构域、拟南芥APUM5PUF结构域,昆虫细胞体内表达了精氨酸甲基转移酶PRMT9。通过NTA亲和层析柱、Hiload 16/60 Supdex 75/200、MonoS/Q等分离纯化手段获得纯度较高、状态良好的目的蛋白质。同时,我们也使用了核磁共振技术、动态光散射实验观测蛋白质状态。并采用等温滴定量热法验证了目的蛋白质与RNA的相互作用,由pull down实验验证了精氨酸甲基转移酶与SF3B2剪辑因子的相互作用。最后,通过晶体学实验筛选到拟南芥APUM5PUF类蛋白质与烟草黄瓜花叶病毒的3’UTR区RNA序列的晶体,但是由于晶体较小,分辨率较低,目前正在优化中。