论文部分内容阅读
泡沫病毒（foamy virus, FV）在分类上属于反转录病毒科、泡沫病毒亚科、泡沫病毒属，同人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus, HIV）以及人T细胞白血病病毒（human T-cell leukemia virus, HTLV）一样，属于复杂的反转录病毒。病毒基因组的两端为长末端重复序列（long terminal repeat, LTR），具有启动子和增强子的双重功能，中间为病毒的三种结构蛋白的基因gag，pol，env，在env基因和3’ LTR之间还存在着一个内部启动子IP（internal promoter），负责启动env基因和3’ LTR之间非结构基因tas，bet等的转录。 Tas作为泡沫病毒最重要的调控蛋白，它通过结合到病毒的LTR和IP上，首先促进自身蛋白的表达进而激活结构蛋白的表达。Bet作为泡沫病毒的另一个非结构蛋白，其研究热度不亚于Tas蛋白。Bet广泛存在于FV感染的细胞内，但是对于FV的Bet蛋白的功能却不甚了解。目前最被人们接受的是Bet类似于HIV的Vif蛋白，可拮抗宿主的限制性因子APOBEC3。 本实验室以自己分离得到的牛泡沫病毒（bovine foamy virus, BFV）3026为材料，对BFV的BTas（BFV Tas）蛋白和BBet（BFVBet）蛋白进行了研究。实验室前期的研究表明，BBet可以抑制BTas对自身LTR启动子的激活。同时， BBet在感染的细胞内可以呈现出多聚化的状态。 本文从BBet蛋白多聚化入手，界定其最小多聚化区域，结果发现第332~336位氨基酸在BBet蛋白多聚化中发挥重要作用，缺失这一区域，BBet多聚化水平明显减弱了。免疫荧光实验证明BBetΔ332-336 aa同野生型相比，其细胞定位没有明显改变，仍然是核浆共定位；同时也构建了缺失BBet多聚化位点的全长感染性克隆pBS-BFV BetΔ332-336 aa，发现BBet多聚化位点缺失后，病毒的复制能力下降了3倍左右。 本研究阐明了BBet的多聚化对病毒复制的作用，为全面了解泡沫病毒的生物学特性迈出了一步，也为将来把泡沫病毒改装成基因治疗载体提供了理论基础。