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鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum，MG)是引起鸡的慢性呼吸道病(chronic respiratory disease CRD)以及火鸡的鼻窦炎的主要病原体。MG粘附于宿主细胞是感染和随后对宿主产生损害的前提条件。抗生素在人医临床和畜牧业的广泛使用，使得鸡毒支原体的耐药性问题日益严重，在抗生素持续压力下，鸡毒支原体必然发生变异，以适应抗生素压力环境。本实验拟初步研究鸡毒支原体耐药性的产生对其粘附力、毒力的影响，为更好地预防和治疗禽类慢性呼吸道疾病提供一定的理论基础及筛选新药靶标等提供思路。 1.诱导获得鸡毒支原体耐药菌株在分别含浓度递增泰乐菌素、恩诺沙星或庆大霉素的液体培养基中连续培养MG标准株S6，获得一系列不同耐药程度的耐药株共9株。结果发现恩诺沙星药物压力下S6更容易产生耐药性。恩诺沙星压力下诱导的系列耐药菌株，低水平耐药株仅在gyrA83位存在Ser-Arg的单突变，而高水平耐药株则额外增加parC的Ser80-Leu突变。泰乐菌株压力下，不同程度耐药水平的MG均在23srRNA V区域基因存在相同的突变，即2150位A-G和2165位C-A突变，提示存在其他不明耐药机制。 2.鸡毒支原体耐药菌株三种粘附蛋白的表达水平与粘附力和侵袭力的关系采用qPCR的方法检测S6和不同抗生素压力下获得的系列耐药株中三种主要粘附蛋白PvpA、GapA和CrmA的表达情况，并利用HELA299细胞侵袭实验检测S6和9株诱导耐药株株粘附力与侵袭力的改变。 从PvpA、GapA和CrmA在S6和各诱导菌株的表达量可以看出：随着菌株的耐药性程度的不断提高，PvpA在诱导耐药菌株中的表达量与S6的表达量相似或有所提高，而GapA和CrmA在诱导耐药菌株中的表达量总体趋势明显降低。细胞粘附与侵袭实验结果表明，随着菌株的耐药性程度的不断提高，诱导菌株对细胞的粘附和侵袭力并没有随着耐药程度的提高而减弱或者消失，而是与S6的粘附与侵袭能力相似。结合蛋白表达与细胞粘附与侵袭实验结果，GapA和CrmA在诱导菌株中的表达量降低，并没有导致诱导菌株对细胞的粘附和侵袭力的降低，而PvpA在诱导菌株中的表达量，随着耐药程度的提高表达量增加。 这说明在GapA和CrmA的表达降低的情况下，菌株为了继续保持对细胞的粘附能力而可能增加了PvpA的表达量，使其的粘附与侵袭力不降低，从而对机体产生致病力。本实验的结果表明PvpA蛋白可能也与鸡毒支原体的侵袭和致病力有关，这结论为研究鸡毒支原体的致病机制提供以及鸡毒支原体疫苗的开发提供新的思路。