地参游离酚对体外肝细胞损伤保护作用的研究

来源 :大理大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:wumujiayou
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目的明确不同采收地、不同采收期地参游离酚的酚含量及其主要酚类化合物的组成;通过体外实验,研究地参游离酚对CCl4所致BRL大鼠肝细胞损伤的保护作用及机制,进一步明确地参游离酚的功能活性,为地参资源的开发利用提供理论依据。方法地参中游离酚的提取采用超声波辅助提取法,并采用X-5大孔树脂对其进行纯化,福林-酚法测定地参游离酚的酚含量;并通过高效液相色谱法(HPLC)分析地参游离酚的单体组成;建立体外CCl4所致BRL大鼠肝细胞损伤的模型,通过测定肝功能指标包括谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)探讨地参游离酚对体外CCl4诱导BRL大鼠肝细胞损伤的保护作用。另外,采用DAPI染色观察细胞核形态,流式细胞术分析细胞周期的分布以及测定抗氧化指标包括超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及一氧化氮(NO)的水平,探讨地参游离酚对体外CCl4诱导BRL大鼠肝细胞损伤的保护机制。结果地参游离酚的酚含量为502.33586.53μg GAE/mg EDW;单体组成分析结果表明迷迭香酸是地参游离酚中的主要酚类化合物,其含量为319.70400.46μg/mg EDW;体外BRL大鼠肝细胞损伤实验结果表明,与模型组相比,地参游离酚对CCl4所致BRL大鼠肝细胞损伤ALT、AST、LDH的升高具有明显的抑制作用(p<0.05);地参游离酚能明显改善CCl4引起的细胞核形态的改变,且能显著降低CCl4引起的sub-G1细胞凋亡峰比例的升高,并能促使细胞转入分裂期;地参游离酚能显著升高CCl4所致BRL大鼠肝细胞损伤细胞中SOD、GSH的水平,降低MDA、iNOS、NO的含量。结果表明地参游离酚可对细胞核形态及细胞周期分布产生一定的影响,并对CCl4所致BRL大鼠肝细胞损伤具有抗氧化保护作用。结论采收地和采收期对地参游离酚的酚含量及主要酚类化合物组成的影响不同;地参游离酚中主要的酚类化合物单体为迷迭香酸;地参游离酚对CCl4所致BRL大鼠肝细胞损伤具有显著的保护作用,且在实验浓度范围内,游离酚浓度与保护作用之间存在良好的剂量效应关系;地参游离酚对CCl4所致BRL大鼠肝细胞损伤的保护作用机制与影响周期分布及抗氧化作用相关。
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