论文部分内容阅读
本实验室前期从拟南芥的T-DNA插入突变体库中筛选获得了一株灰霉病敏感突变体，通过TAIL-PCR技术和生物信息学方法确定了其突变基因为T1N6-22。试验过程中发现，t1n6_22突变体在长日照下开花时间明显延迟，推测该基因参与拟南芥的开花调控过程。在此基础上，本试验对t1n6-22突变体和T1N6-22基因的互补回复突变体（t1n6-22/T1N6-22）进行不同光照时间、赤霉素和春化处理，通过分析突变体的花期确定T1N6-22基因在拟南芥开花调控过程中的功能;利用RT-PCR技术，检测突变体中开花调控途径相关基因的表达情况，确定T1N6-22基因参与的拟南芥开花调控途径。研究结果为明确T1N6-22基因调控拟南芥开花的分子机制奠定基础。主要研究结果如下:
1.无论长日照还是短日照条件，t1n6-22突变体均表现为晚花表型，回复突变体的花期与野生型基本一致，明确了T1N6-22基因为拟南芥开花调控基因。
2.在长日照或短日照条件下，赤霉素或春化处理可使t1n6-22突变体的花期明显提前，与野生型的基本一致。t1n6-22突变体对赤霉素和春化均有正常的响应。此特性与自主途径的相关突变体类似。推测T1N6-22基因可能参与自主途径调控拟南芥的开花。
3.利用RT-PCR技术，对拟南芥野生型、t1n6-22突变体和回复突变体中开花调控途径相关基因的表达进行分析。发现t1n6-22突变体中自主途径相关基因LD、FVE和FLC的表达水平均上调;长日照条件下赤霉素处理使t1n6-22突变体中的赤霉素途径相关基因，SPY1和SPY2的表达水平明显下调，短日照条件下，SPY1、SPY2的表达没有明显变化;春化处理对t1n6-22突变体中春化途径相关基因VRN1、VRN2和FLC的表达均无明显影响。进一步确定了T1N6-22基因可能通过自主途径调控拟南芥的开花。
4.利用RT-PCR技术，对T1N6-22基因在不同组织的表达模式进行了分析。发现T1N6-22基因在莲座叶、花、茎和茎叶中均有不同程度的表达，在花中表达量最高，其次是莲座叶。