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目的：体外培养大鼠神经胶质瘤C6细胞,将从E.coli DH5a中提取的含有IL-24的质粒DNA转染C6细胞,检测IL-24体外对C6细胞的生长抑制效果,探寻治疗神经胶质瘤的有效方法。方法：用LB培养基培养E.coli DH5a菌种,从E.coli DH5a培养基中用质粒提取试剂盒提取pEGFP-C1载体和pEGFP-IL-24质粒,分别用限制性核酸内切酶XhoI和EcoRI双酶切后,经琼脂糖凝胶电泳,验证提取质粒的准确性,并做质粒DNA浓度、纯度的测定。体外培养C6细胞,用脂质体法将提取的pEGFP-C1和pEGFP-IL-24转染C6细胞,同时设未处理的C6细胞和加入阿霉素的C6细胞为对照组。在荧光显微镜下观察四组细胞EGFP的表达,以说明是否将质粒转染入C6细胞中。四组细胞在转染48小时后用高倍镜观察其形态学变化；通过吖啶橙/溴化乙锭荧光染色后的不同颜色,辨别C6细胞的存活状态；用MTT比色法测定不同时间C6细胞的吸光度值,检测细胞的生长情况,结果用x±s表示,统计软件做方差分析,P<0.05时有显著性差异。结果：从含有pEGFP-C1载体的E.coli DH5a菌种中提取的质粒DNA,由限制性核酸内切酶酶切后,经琼脂糖凝胶电泳发现,有一条约4700bp的片段,与预期的相符。从含有pEGFP-IL-24的E.coli DH5a菌种中提取的质粒DNA,由限制性核酸内切酶酶切后,经琼脂糖凝胶电泳发现,有两条条带,分子量大小约4700bp和660bp,符合pEGFP-C1载体大小和IL-24大小,对照的未经酶切的没有小条带。做质粒纯度测定,OD260/OD280约为1.8,质粒纯度较高。C6细胞经各组质粒转染后在荧光显微镜下观察发现,转染了pEGFP-C1和pEGFP-IL-24的C6细胞有部分发绿色荧光,而未转染质粒的细胞没有绿色荧光,可见能够将质粒DNA转染进C6细胞中,并在细胞中表达。转染后48小时,四组细胞在高倍镜下观察发现,转染了pEGFP-IL-24和加入阿霉素的C6细胞,细胞不贴壁,变圆、皱缩,而转染了pEGFP-C1和未处理的C6细胞,细胞贴壁生长,细胞呈梭形或多角形。四组细胞经吖啶橙/溴化乙锭荧光染色后发现,转染了pEGFP-IL-24和加入阿霉素的C6细胞,细胞大多呈橘黄或红色,部分细胞已裂解,为凋亡细胞,而转染了pEGFP-C1和未处理的C6细胞,大多细胞质着绿色,细胞大而圆,为正常细胞。MTT比色法显示,转染了pEGFP-IL-24与加入阿霉素的C6细胞相比,C6细胞的生长没有显著性差异(P>0.05),而转染了pEGFP-IL-24的C6细胞的生长与转染了pEGFP-C1或未处理的C6细胞相比,有显著性差异(P<0.05,P<0.05)。由生长曲线图可看出转染了pEGFP-C1和空白对照的C6细胞生长曲线相类似,而转染了pEGFP-IL-24和加入阿霉素处理的C6细胞增殖明显受抑制。结论：1、成功提取pEGFP-C1载体和pEGFP-IL-24质粒,并经酶切、电泳验证了提取质粒的准确性。2、采用脂质体法可将pEGFP-C1和pEGFP-IL-24转染至C6细胞中,并在C6细胞中表达。3、IL-24基因可诱导大鼠神经胶质瘤C6细胞发生凋亡,抑制其在体外增殖。4、IL-24基因用于神经胶质瘤的治疗有潜在的价值。