【摘 要】
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明确蛋白质的结构和功能对于医学发展有着重要的意义。目前,得到尺寸足够大和质量足够好的蛋白质晶体成为探索蛋白质结构的一大瓶颈。影响蛋白质晶体生长的因素包括温度、溶液
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明确蛋白质的结构和功能对于医学发展有着重要的意义。目前,得到尺寸足够大和质量足够好的蛋白质晶体成为探索蛋白质结构的一大瓶颈。影响蛋白质晶体生长的因素包括温度、溶液浓度、pH值、对流等。对流对蛋白质晶体生长的影响至关重要。研究对流对蛋白质晶体生长的影响,对于得到足够大和完整的蛋白质晶体具有重要的现实意义。
本文设计双T形PMMA微通道样品池,利用注射泵控制样品池中溶液的流动速度,定量研究强制对流对溶菌酶晶体{110}面生长的影响。实验显示:在过饱和度σ=2.3时,{110}面平均生长速率,在无流速时,平均生长速率最大;随流速增大,生长速率逐渐减小,在流速2000μm/s附近晶体停止生长。在过饱和度σ=2.7时,{110}面平均生长速率,开始时均随流速的增大而增加;在1700Wn/s-1900μm/s流速下,生长速率达到最大值;当流速大于1900μm/s,生长速率随流速增大逐渐减小,至12000μm/s后基本停止生长。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染色法对溶菌酶进行分离,使用薄层色谱量化溶菌酶的纯度。结果显示实验用鸡蛋清溶菌酶的纯度为:94.7%,所含杂质主要是18 KDa的多肽和28KDa的溶菌酶二聚体。在杂质含量较高的条件下,过饱和度不同,对流对蛋白质晶体生长的影响也不同。结合动态光散射测量的实验结果认为,当过饱和度较低时,对流会减小蛋白质晶体的生长速度;当过饱和度较高时,流速较低的对流会促进蛋白质晶体的生长,而流速较高的对流会抑制蛋白质晶体的生长。
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