【摘 要】
：
本文以基因克隆、表达和淋巴细胞杂交瘤技术为基础,制备并鉴定了针对秦川黄牛成熟朊蛋白mPrP的单抗,以期用于疯牛病的免疫诊断研究. 在秦川黄牛、甘肃土种绵羊和汉族人朊蛋白
论文部分内容阅读
本文以基因克隆、表达和淋巴细胞杂交瘤技术为基础,制备并鉴定了针对秦川黄牛成熟朊蛋白mPrP的单抗,以期用于疯牛病的免疫诊断研究. 在秦川黄牛、甘肃土种绵羊和汉族人朊蛋白PrP和叠朊Dpl编码基因0RF的基础上,进一步构建出含成熟蛋白编码基因的重组表达质粒,经IPTG诱导实现了3个mPrP和13个mDpl的E.coli中的高效表达.以SAF-70单抗为检测抗体的Western Blot分析表明3个重组mPrP不仅具有强的反应原性而且能够在细胞内形成二聚体.蛋白酶K消化结果农明重组mPrP不具有朊病毒PrP的蛋白酶K抗性.
以纯化复性的黄牛mPrP免疫Balb/C鼠,加强免疫3天后取脾细胞与SP2/0细胞融合,间接ELISA法筛选阳性细胞株,并进一步鉴定和层析法纯化的腹水抗体.结果表明获得了7个能稳定分泌抗黄牛mPrP的细胞株,除N17抗体属于IgG2b外,其余均属于IgG2a.7个单抗腹水效价介于1×10<4>-1×10<4>之间,亲和常数介于10<9>-10<12>之间,与黄牛mPrP发生特异性反应,与绵羊和人的mPrP发生交叉反应,不与mDpl反应.表位分析显示单抗N15,N25,N59,N63和N67识别相同的抗原表位,单抗N17和N64识别mPrP羧基端的不同表位.Western Blot分析表明腹水单抗N64和N17可与健康黄牛脑组织PrP反应.实验获得的单抗N64和N17有望作为疯牛病的核心诊断试剂,为开发相关诊断试剂盒奠定了基础.
其他文献
摘 要：新的世纪对素质教育提出了更高的要求，要求学生在德、智、体、美、劳等方面的身心素质和能力都得到全面发展和提高。班主任是班级工作的具体实施者，在素质教育实施过程中起着举足轻重的作用。笔者从品德教育、情感教育、心理教育三方面阐述了自己的观点。 关键词：品德教育 情感教育 心理教育 素质教育从某种意义上讲不是一般的知识教育、技能教育、操作教育，而是一种具有开发性的心理教育、情感教育、意志道
语文教材不断的更新,对语文教学提出了更高的要求,改变语文的教学理念,要培养促进学生发展的语文素养,方法是挖掘语文教育与生活紧密相连.
通过２年春小麦田间试验分析，研究了水肥对其产量的协同效应，结果表明：水肥对春小麦产量有明显的正效应和交互效应，在试验范围内平均水分主效应＞平均肥力主效应；春小麦水肥效应函数为
重视教育的思想，在中国历来都刻有深深的印记，当代社会的重视程度尤为突出。 在经济日益发达的今天，大多数家长在孩子身上花费的教育经费比家庭日用要多得多。在南京地区，有85%的家长在小学阶段的孩子身上平均每月花费的支出为600—800元不等，而61%二年级以上孩子的家庭月平均教育支出达1000元以上。很多家长让孩子平时学英语、学跳舞、学钢琴、学画画、游泳…… 家住淮安的朱女士，把每月在超市打工的钱
本文以唱游和律动教学为例,对运用奥尔夫教学法培养特殊儿童的节奏感进行了详细探讨,并总结了相关的教学策略,为教育同仁开展相应教育实践提供了有价值的参考.
报道了利用大豆自花受粉后形成的花粉管通道,将外源高蛋白野生大豆总DNA直接导入栽培大豆的实验结果及对导入转化后代的分子验证。 结果显示:在D_1代所获7个单株中有1株发生
班级是孩子们学习成长的摇篮!针对阅读而言,阅读是孩子们学好各门学科的关键,是孩子们走向成功的关键.所以老师无论何时、何科的教学一定要重视孩子们阅读的能力的提升.
利用X射线衍射分析(XRD)详细地研究了石墨/LiCoO2体系18650型锂离子电池充放电过程中正负极活性材料的晶体结构和微结构的变化.结果发现,在电池充电过程中,锂嵌入石墨层中,优
最近一段时间,我经常在思考记者对人民群众的思想感情问题。前些天,我翻阅了一本名叫《西口大逃荒》的书,我觉得,倡导记者在深入实际调查研究的过程中,努力培养与人民群众息
流感病毒包含四种膜整合蛋白：HA、NA、M1和M2。甲型流感病毒A/M2蛋白具有离子通道的活性，可以将质子泵入内体，从而激活膜融合过程。在病毒的脱壳过程中，A/M2能够促进病毒核蛋白NP