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随着DNA测序技术的发展和测序策略的完善,大规模基因组测序已不再是人们的梦想.目前的基因组测序策略大都建立在上世纪80年代美国科学家Sanger发明的鸟枪法基础之上,鸟枪法的随机性使它们都不可避免地带有测序冗余度高,片段拼接困难等症结.该研究提出一种基于单分子操纵技术的新型测序策略:有序化基因组测序策略.该策略彻底消除了Sanger的化学方法带来的随机性.首先将单个靶DNA序列拉直进行有序切割,再对每个片段分别进行PCR扩增并测序得到片段信息,之后将所有片段顺序组合,最终还原出整个目标基因组的一致序列.有序化测序使得后期的片段拼装工作高度简化,工作量随之大大降低.在整个测序过程中,单分子定位切割拾取技术以及单分子PCR(PolymeraseCycle Reaction)技术都是其中非常关键的步骤,因此该研究同时也对单分子PCR反应的产物错误率以及扩增效率进行了计算及讨论.通过计算单分子PCR产物错误率,我们发现只要很好地控制反应条件,它的数值是在一个可以接受的范围之内,能够保证测序的成功;而单分子PCR扩增效率我们认为它很可能要高于常规PCR的扩增效率,这一点还需要实验的进一步验证.