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背景与目的: 我国是食管癌的高发国家，发病率和死亡率位于世界首位，河南省是食管癌的高发省份，同时也是造成当地癌症死亡的主要原因。目前的治疗方法效果均不甚满意，并且存在一定的局限性。寻找导致食管癌恶性增殖的分子靶点并对其靶向治疗成为近年来食管癌治疗研究的热点之一。 在哺乳动物细胞中存在3种Cdc25同源基因，其中Cdc25A是一个促进细胞由G1期进入到S期必须的细胞周期调控磷酸酶，能够将细胞周期蛋白依赖性激酶（cyclin-dependentkinase，CDK）苏氨酸、酪氨酸残基抑制性磷酸化，在细胞周期调控中发挥重要作用。已有报道表明在肝癌、乳腺癌、宫颈癌、胃癌等一些常见肿瘤中Cdc25A表达水平显著增高，但有关Cdc25A表达在食管癌发生、发展中的作用尚未见文献报道。 为探讨Cdc25A基因的异常表达在食管癌发生和发展中的作用，本研究采用Cdc25A反义寡聚核苷酸(antisenseoligonucleotide，ASODN)处理食管癌EC9706细胞，采用免疫细胞化学技术检测细胞中Cdc25A、CDK2、cyclinE蛋白的表达，采用原位杂交技术检测细胞中Cdc25A、CDK2、cyclinE的mRNA的表达。运用CCK-8试剂盒检测细胞的增殖情况。 方法: 1.设计合成Cdc25A反义寡核苷酸(Cdc25AASODN)、无关寡核苷酸序列(Cdc25AN-ODN)，分别用不同浓度(5μmol/ml、10μmol/ml、15μmol/ml)的Cdc25AASODN和Cdc25AN-ODN转染EC9706细胞24h、48h、72h。将脂质体转染的细胞作为空白对照组。 2.免疫细胞化学检测不同浓度各组细胞中Cdc25A、cyclinE、CDK2的蛋白表达情况。 3.原位杂交检测各组细胞中Cdc25A、cyclinE、CDK2的mRNA表达情况。 4.采用CCK-8试剂盒检测转染Cdc25AASODN和Cdc25AN-ODN后对食管癌EC9706细胞增殖能力的影响。 5.使用SPSS18.0软件进行统计学分析，检验水准为α=0.05。 结果: 1.与对照组比较ASODN组中Cdc25A蛋白和mRNA表达显著降低(P＜0.05)，且有浓度依赖性和时间依赖性，Cdc25A的表达随转染浓度的增加以及时间的延长而减少。浓度为15μmol/mlCdc25AASODN作用72h效应最好。 2.ASODN组中cyclinE蛋白和mRNA表达较空白对照和N-ODN组显著降低(P＜0.05)，且随着浓度或时间的增加而其表达随之降低，在同一时间的不同浓度和同一浓度的不同时间均有显著性差异(P＜0.05)。浓度为15μmol/mlCdc25AASODN作用72h时效应最好。 3.ASODN组中CDK2蛋白和mRNA表达较空白对照和N-ODN组显著降低(P＜0.05)，且随着浓度或时间的增加而其表达随之降低，在同一时间的不同浓度和同一浓度的不同时间均有显著性差异（P＜0.05）。浓度为15μmol/mlCdc25AASODN作用72h时效应最好。 4.N-ODN组和空白对照组EC9706细胞的增殖无明显差异(P＞0.05)。ASODN组与N-ODN组和空白对照组相比存转染2d细胞的增殖明显受到抑制(P＜0.05)。 结论: 1.Cdc25AASODN能特异性的抑制食管鳞癌EC9706细胞中Cdc25A蛋白和mRNA表达，同时下调cyclinE、CDK2蛋白和mRNA表达。 2.Cdc25AASODN能够通过抑制Cdc25A蛋白和mRNA表达，进而抑制EC9706细胞的增殖，这为靶向治疗食管鳞癌提供理论基础。