【摘 要】
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目的：建立一种灵敏度高、特异性强、精密度好、操作简便的技术,对人单个核细胞内含有的IL-1α mRNA的进行定量检测.方法：以光学显微镜计数的人外周血单个核细胞为标本,提取标本
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目的：建立一种灵敏度高、特异性强、精密度好、操作简便的技术,对人单个核细胞内含有的IL-1α mRNA的进行定量检测.方法：以光学显微镜计数的人外周血单个核细胞为标本,提取标本中总的RNA.用生物学软件Primer Premier5.0设计针对IL-1α mRNA核酸序列的一对引物的两条探针,经过逆转录反应获得对应地IL-1α mRNA的单链cDNA,cDNA经过聚合酶链反应得到扩增了百万甚至千万倍的双链DNA片段.设计的检测探针可与被捕获探针捕获的扩增子的另一段特异结合,而检测探针的5’端是用生物素修饰好了的,生物素又可与亲和素标记的辣根过氧化物酶结合,最后在微孔板内加入辣根过氧化物酶的底物即可显色并作为最后的检测信号.结果用单位单个核细胞中的吸光度值来表示.结论：该方法操作简单、灵敏度高、特异性强、结果数据化,适合于临床实验室进行IL-1α mRNA的定量检测.
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