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虫生真菌作为一种宝贵的自然资源,长期以来在农业害虫的生物防治方面凸显了自己的重要地位。金龟子绿僵菌和球孢白僵菌作为两类重要的昆虫病原真菌,可寄生多种昆虫,更是在害虫生物防治中发挥了其巨大的作用。本文以白僵菌和绿僵菌为主要研究对象,初步探究了虫生真菌对常见病原真菌的拮抗作用研究,以及通过对其发酵液中抗菌物质理化性质分析,为以后微生物杀菌剂剂型的开发提供了理论依据。其主要研究结果如下: 1.对农作物重要真菌病害有拮抗作用的虫生真菌的初步筛选 通过平板对峙培养,筛选出对重要病原真菌具有拮抗作用的虫生真菌两种,其中白僵菌种属是以编号为Bb1的球孢白僵菌对三种病原菌的抑制效果最好,对编号为WW1、NGA4、TC-7、WTB-1的油菜菌核病菌丝抑制率在第3d时均达到45％以上,对棉花枯萎病菌菌丝的抑制率为34.14%、对小麦赤霉病菌的抑制率为31.15%。编号为Ma09、Ma22、Ma32的绿僵菌在第5d时,对玉米弯孢病菌菌丝的抑制率分别为42.67%,41.13%,45.64%。 2.白僵菌对几种重要病原真菌的拮抗作用研究 本文主要通过测定不同浓度的白僵菌孢悬液对三种病原真菌的抑制作用,最后得出编号为编号为Bb1的球孢白僵菌分生孢子浓度为4.65×106cfu·mL?1时,对三种病原真菌的抑制效果最好。其中,培养至第3d时对油菜菌核病菌的4个菌株的抑制率均在50%以上,对棉花枯萎病病菌的菌丝生长抑制率达到53.38%,对小麦赤霉病菌的菌丝生长抑制率达到51.08%。在对白僵菌Bb1的发酵液进行培养14d后,将发酵液与PDA培养基混匀后分别接种三种病原真菌,实验结果表明,在培养至第5d是,白僵菌代谢液对油菜菌核病菌菌丝(WW1)生长抑制率达到49.17%,对棉花枯萎病菌菌丝生长抑制率达到55.48%,对小麦赤霉病菌菌丝的抑制率达48.31%。 3.绿僵菌对玉米弯孢病菌的拮抗作用研究 本文通过测定编号为Ma09、Ma22和Ma32三种金龟子绿僵菌对玉米弯孢病菌的菌丝抑制率,在培养至第5d时,抑制率均为40%以上。通过不同浓度的绿僵菌孢悬液对玉米弯孢病菌菌丝抑制率测定得出,在培养至第5d时,三种绿僵菌对其抑制率分别为57.78%、56.61%和63.94%。其中Ma32的抑制效果最好,在对金龟子绿僵菌Ma32的发酵液对玉米弯孢病菌菌丝生长的抑制率进行测定时发现,培养14d的金龟子绿僵菌发酵液对玉米弯孢病菌的菌丝生长抑制作用最好,在菌丝培养至第5d时,发酵液对其抑制率达到45.22%。 4.白僵菌和绿僵菌发酵液理化性质分析 本文通过对白僵菌Bb1和绿僵菌Ma32发酵液的热稳定性、光稳定性以及酸碱稳定性等一系列理化性质进行测定后,发现其发酵液中抑菌成分受温度影响不大,只有在高温121℃时加热30min后,其抑菌效果下降较为明显。同时,对光照也具有一定的稳定性,不会随着光照时间的变化,出现抑菌率下降。在酸碱稳定性方面,白僵菌Bb1和绿僵菌Ma32的发酵液中抑菌成分在碱性条件下较酸性条件更稳定,其中,pH=10时抑制率达到最高。pH=12时,其抑菌效果开始下降。