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背景:肺癌是对人类健康构成严重危害的常见恶性肿瘤之一,大部分患者首次确诊时因病期较晚而失去手术机会,EGFR-TKI可作为晚期肺癌的一线治疗方案,然而随着用药时间的延长,几乎所有初治有效的患者在大约1年内都会出现耐药,耐药极大限制了EGFR-TKI在肺癌中的临床应用。HDACIs是一类新型的靶向表观遗传药,可通过改变染色体特定区域组蛋白与非组蛋白的乙酰化水平而影响基因的转录与表达。HDACIs在血液系统肿瘤中单药就可表现出显著疗效,而在实体瘤中HDACIs与传统化疗药、靶向药及放疗联用,具有协同抗肿瘤作用。SAHA是一种广谱的羟肟酸类HDACI,是首个被FDA批准用于治疗PTCL的HDACI。本实验通过建立H1975肺癌裸鼠移植瘤模型,探究SAHA联合厄洛替尼是否具有体内协同抗肿瘤作用及其作用机制。目的:通过观察SAHA联合厄洛替尼对H1975肺癌裸鼠移植瘤生长的影响,探讨SAHA逆转EGFR-TKI耐药的可能机制,为HDACIs在肺癌的临床应用提供一定的理论依据。方法:（1）动物建模及分组给药:将5′106个H1975细胞注射到Balb/c裸鼠右腋下,每周测量肿瘤大小23次,建模成功后选取肿瘤大小居中且均一性较好的荷瘤裸鼠随机分为4组,每组8只:对照组（PBS）、SAHA组（SAHA 50 mg/kg）、厄洛替尼组（erlotinib 30 mg/kg）、联合组（SAHA 50 mg/kg+erlotinib 30 mg/kg）,连续灌胃给药21d。（2）肿瘤大小及相对肿瘤增殖率:用游标卡尺每周测量肿瘤大小23次,并计算肿瘤体积（Tumor volume,TV）、相对肿瘤体积（Relative tumor volume,RTV）和相对肿瘤增殖率（T/C）。TV=1/2ab2（a为长径,b为短径）,取其平均值并绘制肿瘤生长曲线;RTV=Vt/V0,V0为给药前（即d0）测的肿瘤体积,Vt为给药后测的肿瘤体积;T/C是实验组RTV与对照组RTV比值的百分比(T/C=TRTV/CRTV′100%)。（3）瘤重及抑瘤率:实验结束,剖取肿瘤组织,称瘤重（Tumor weight,TW）,并计算肿瘤抑瘤率（Tumor growth inhibition,TGI）,TGI=（1-实验组平均瘤重/对照组平均瘤重）′100%;利用金氏公式计算Q值以评估两药联合的效果,Q=EA+B/（EA+EB-EA×EB）,EA+B为联合组的抑瘤率,EA和EB为单药组的抑瘤率。（4）Western blot:Western blot检测各组裸鼠肿瘤组织中PI3K/AKT/mTOR和MAPK/ERK两条信号通路中相关蛋白的表达。（5）IHC:IHC检测各组裸鼠肿瘤组织中p-AKT、p-mTOR、p-ERK的表达。（6）增殖率及凋亡率:HE染色法观察肿瘤组织大体形态结构改变,免疫组化Ki-67染色法检测肿瘤细胞的增殖情况,TUNEL染色法检测肿瘤细胞的凋亡情况;用Image J软件统计肿瘤细胞的增殖率和凋亡率。结果:（1）成功建立H1975肺癌裸鼠移植瘤模型,成瘤率100%。（2）肿瘤大小及瘤重:TV:对照组（1838±469）mm3,SAHA组（1669±428）mm3,厄洛替尼组（1648±355）mm3,联合组（1061±205）mm3;TW:对照组（2.41±1.02）g,SAHA组（2.11±0.69）g,厄洛替尼组（1.95±0.67）g,联合组（1.01±0.30）g,联合组与单药组及对照组相比,差异有统计学意义（F=7.58、8.59,P<0.05）。（3）T/C及TGI:T/C:对照组100%,SAHA组90.8%,厄洛替尼组89.7%,联合组57.7%;TGI:对照组0,SAHA组12.5%,厄洛替尼组19.1%,联合组54.4%。T/C≤60%且TGI≥40%（P<0.05）,两药联合的Q值为1.86。（4）Western blot:SAHA联合厄洛替尼可在不影响AKT、mTOR、ERK总蛋白表达的情况下,显著下调p-AKT、p-mTOR、p-ERK的表达,与单药组及对照组相比,差异有统计学意义（F=8.64、25.19、46.12,P<0.05）。（5）IHC:与对照组相比,单药组对H1975肿瘤组织中p-AKT、p-mTOR、p-ERK的表达无明显影响（P>0.05）,而联合组却能显著抑制肿瘤组织中p-AKT、p-mTOR、p-ERK的表达（F=5.28、9.67、10.44,P<0.05）。（6）增殖率及凋亡率:增殖率:对照组（29.12±7.24）%,SAHA组（26.36±7.27）%,厄洛替尼组（27.15±3.40）%,联合组（17.98±5.03）%;凋亡率:对照组（2.35±1.25）%,SAHA组（6.39±1.79）%,厄洛替尼组（6.44±5.07）%,联合组（12.15±5.43）%,联合组与对照组及单药组相比,差异有统计学意义（F=5.44、8.67,P<0.05）。结论:SAHA联合厄洛替尼可部分逆转EGFR-TKI耐药,显著增强在H1975肺癌裸鼠移植瘤中的疗效,SAHA与厄洛替尼联合有协同抑瘤作用,可能与抑制PI3K/AKT/mTOR和MAPK/ERK信号通路中相关蛋白的活化有关。