论文部分内容阅读
目的:对采用超临界CO2萃取等现代分离技术提取纯化得的莪术油及其主要活性成分呋喃二烯进行抗子宫肌瘤作用的初步药效学研究，并探讨其机制，以提高莪术油药效学品质与研究质量控制的关键技术。 方法:①采用雌孕激素联合负荷法造大鼠子宫肌瘤模型。隔日股内侧肌注己烯雌酚注射液0.04mg/只、一周肌注1次黄体酮注射液1.0mg/只，连续12周。造模同时给药，末次给药后1h，大鼠眼眶毛细血管取血，采用自动血液流变学测定仪测定全血粘度、全血还原粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数、刚性指数、变形指数和电泳指数;按放免法测血清雌二醇(E2)、孕酮(P)性激素水平和一氧化氮合成酶(NOS)活性。处死大鼠取子宫和卵巢，精密称取并计算子宫、卵巢脏器系数（脏器重量/大鼠体重×100）;子宫HE染色后于电子显微镜下观察子宫病理组织状况。 ②采用雌激素单因素法造小鼠子宫肌瘤模型。每天肌肉注射苯甲酸雌二醇溶液2mg/kg，连续15天。造模同时给药，末次给药后1h，小鼠眼眶取血，分离血清，按放免法测血清雌二醇(E2)、孕酮(P)性激素水平和一氧化氮合成酶(NOS)活性。处死小鼠，观察子宫、卵巢大体形态，沿子宫膀胱连接处剪取子宫，称重并计算脏器系数（子宫重量/小鼠体重×100）;HE染色后于电子显微镜下观察子宫病理组织状况。 结果:①与模型对照组比，莪术油注射组大鼠高、中、低不同切变率下的全血粘度及全血还原粘度显著性降低，红细胞聚集指数、刚性指数、变形指数、电泳指数，血浆粘度显著性降低;血清中雌二醇、孕酮激素水和NOS酶活性显著性降低;子宫壁厚度、子宫重量和子宫脏器系数显著性降低(p＜0.05～0.01);明显改善子宫组织病理学。呋喃二烯注射组大鼠低、中切变率下的全血还原粘度、血浆粘度显著性降低;血清中雌二醇、孕酮激素水平显著性降低;子宫壁厚度、子宫重量和子宫脏器系数显著性降低(p＜0.05);改善子宫组织病理学。呋喃二烯灌胃组大鼠高切全血还原粘度、血清NOS酶活性显著性降低(p＜0.05);改善子宫组织病理学。 ②与模型对照组比，莪术油注射组小鼠血清NOS酶活性、子宫重量和子宫脏器系数显著性降低;改善子宫组织病理学状态。呋喃二烯注射组小鼠血清中雌二醇激素水平、血清NOS酶活性、子宫重量显著性降低;改善子宫组织病理学状态。呋喃二烯灌胃组小鼠血清中NOS酶活性显著性降低;改善子宫组织病理学状态。 结论:①已烯雌酚和黄体酮联合负荷法造模后，模型组大鼠血液流变学指标出现血液浓、黏、凝、聚状态，子宫壁增厚、子宫内膜增生，大体观子宫色泽晦暗，镜下观察子宫平滑肌增生，细胞排列紊乱，表明成功建立子宫肌瘤大鼠模型。采用雌激素法造小鼠子宫肌瘤模型后，模型组小鼠子宫脏器系数升高，内膜增生，镜下观察子宫平滑肌增生，细胞排列紊乱。 ②莪术油和呋喃二烯注射给药均能降低血清NOS酶活性，综合调节雌孕激素水平，改善模型大鼠血流变学浓、黏、凝、聚的“淤血内阻”症状，从而改善雌孕激素刺激引起的子宫壁和内膜的增生，达到防治子宫肌瘤目的。莪术油活血化瘀，行气破血，改善子宫血流及微循环作用较强，且含有β-榄香烯、莪术醇等抗肿瘤活性成分，因此莪术油抗子宫肌瘤效果优于呋喃二烯;呋喃二烯注射给药抗子宫肌瘤效果优于呋喃二烯灌胃给药，提示可能因灌胃首过效应使呋喃二烯经胃肠道在尚未吸收进入血循环前，部分药物在肠粘膜和肝脏被代谢，而使进入血循环的药量减少，药效降低。 ③莪术油和呋喃二烯通过降低血清中雌孕性激素水平，降低子宫肌瘤组织中NOS酶活性，影响NO表达，特异性地改变局部循环，抑制血管扩张，较少子宫肌瘤组织血液供应，从而抑制肌瘤细胞的生长和代谢，发挥治疗子宫肌瘤的作用。提示莪术油和呋喃二烯对子宫肌瘤的作用机制可能通过降低NOS酶活性而实现。