富血小板血浆对大鼠颌下腺细胞作用的实验研究

• 作 者: 杨侠
• 机 构: 中国医科大学
• 出 处: 中国医科大学
• 发表日期: 2013年期
• 关键词: 颌下腺细胞 富血小板血浆 促进 分泌增殖

目的：　　
观察PRP对体外培养SD大鼠颌下腺细胞(rat submandibular gland cells，RSMGs)增殖与分泌功能的影响，探讨富血小板血浆诱导RSMGs增殖分泌的可能性。　　
方法：　　
从SD大鼠股动脉抽取全血，参照Landesberg方法制备PRP，配置浓度为10％的PRP，然后体外组织法原代培养3天龄SD大鼠的颌下腺细胞(RSMG-cell)，免疫组织化学方法进行细胞来源鉴定，传代。将浓度为10％的富血小板血浆与浓度为2.0×104/ml的第2代颌下腺细胞接种于培养皿体外培养，作为实验组。同时将2.0×104/ml的第2代颌下腺细胞悬液接种于培养皿体外培养，作为对照组。观察颌下腺细胞增殖情况，于培养第3天取材，透射电镜观察细胞内部超微结构，分别取共同培养1天到7天的培养上清液，测定淀粉酶含量，检验加入富血小板血浆培养的颌下腺细胞功能。使用western blot检测两组细胞IGF，TGF-β，VEGF的表达情况，采用SPSS for windows13.0统计分析软件对结果进行两个独立样本t检验，检验水准a=0.05，P＜0.05认为有统计学差异。　　
结果：　　
10％的富血小板血浆参与颌下腺细胞的体外培养，透射电镜表明，在实验组胞核染色质明显，可见核小体，核内外染色质散在分布，并含水有大量的分泌颗粒及少量酶体，见丰富的游离核糖体。MTT实验显示:实验组的细胞在5、7、9d增殖速度与对照组有显著的差异(P＜0.05)，且优于对照组。淀粉酶实验表明，3、5、7d唾液淀粉酶浓度在实验组高于对照组，且相比有明显差异(P＜0.05)。通过western blot，实验组IGF-1，TGF-β，VEGF的表达情况，经SPSS软件分析，实验组与对照组存在统计学差异(P＜0.01)。　　
结论：　　
10％PRP对体外培养的大鼠颌下腺细胞增殖分化具有促进作用。