三维重编程小鼠胚胎成纤维细胞治疗大鼠脑损伤研究

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神经干细胞移植是脑损伤的一种有效治疗方法,但细胞治疗方法的发展一直受到限制,原因之一是缺乏合适的种子细胞。最近细胞重编程技术的发展为解决这一问题提供了一个良好的契机。但是目前常用的重编程细胞技术在临床领域的运用前景也受到其他方面的限制,比如虽然目前人们可以使成纤维细胞重编程为神经干细胞,但这样获得的神经干细胞通常都是通过病毒转基因方式获得的,这种方法有可能使病毒等外源基因整合到细胞基因组中,为脑损伤的治疗带来安全隐患。我们通过三维成球培养的方式,诱导成纤维细胞重编程为神经干细胞,细胞免疫化学检测发现三维成球培养的MEFs表达神经干细胞标志物nestin和Sox2的比例显著高于二维MEFs,同时三维培养MEFs神经营养因子、血管生长因子和神经诱导因子等有利于神经损伤修复的因子表达水平明显高于二维MEFs。随后我们建立了大鼠脑损伤动物模型,将三维成球培养的MEFs移植到神经损伤部位,神经损伤程度行为学评分(mNSS)检测和Morris水迷宫实验检测结果表明,三维成球培养的MEFs相比二维MEFs能够更好地促进脑损伤后神经功能的恢复;组织免疫荧光染色结果表明,三维MEFs部分分化成了神经元、星型胶质细胞和少突胶质细胞。这项工作提示我们三维成球培养重编程的MEFs获得神经干细胞潜能可为临床治疗脑损伤提供安全的细胞来源。
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