异常凝血酶原N端F1片段及其抗血清的制备

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中国是原发性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的高发区.现阶段中国在原发性肝癌的诊断方面仍是采用影像技术与肿瘤标志物的检测相结合的方法.甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)从20世纪60年代起就作为肝脏恶性肿瘤的标志物,被广泛应用于临床.但AFP有时呈现假阴性和假阳性.近年来发现了不少有意义的新肿瘤标志物,其中甲胎蛋白异质体(AFP variants)和异常凝血酶原(ahnormal prothrombin,简称APT)较有价值,与AFP联合检测可不同程度的提高HCC诊断精确度.我们针对正常凝血酶原与异常凝血酶原只有N端谷氨基酸残基羧化程度不同的性质,从正常人血浆中经钡盐吸附、分段盐析、DE-52离子交换层析分离纯化到正常凝血酶原,然后经牛凝血酶酶切、DE-52离子交换层析分离纯化到正常凝血酶原,然后经牛凝血酶酶切、DE-52离子交换层析分离纯化到凝血酶原片段1,该片段再经加热脱羧后得到异常凝血酶原N端F1片段,将该片段免疫动物,获得的抗血清与HCC患者血浆有抗原抗体反应,与正常人血浆无反应.从而为研制检测HCC的试剂盒奠定了基础.
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