负载Photosan氧化硅纳米颗粒对肝癌细胞的光动力杀伤效果及其介导的自噬现象观察

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目的探讨负载Photosan氧化硅纳米颗粒对肝癌细胞的光动力杀伤效果,并初步观察该纳米颗粒介导PDT过程中的自噬现象。方法采用一步湿化学合成途径制备氧化硅纳米空心球装载的光敏剂Photosan。观察Photosan和中空硅纳米粒子装载的Photosan(以下简称纳米化Photosan)介导的光动力疗法(Photodynamic Therapy,PDT)对体外培养人肝癌细胞Huh-7的光动力杀伤作用。应用MTT法测定其生存率和用Annexin V-FITC/PI双染法检测PDT对人肝癌细胞Huh-7细胞凋亡的影响。Western blot检测PDT对自噬小体蛋白标志物表达的影响。透射电镜下观察PDT对肿瘤细胞自噬的情况。结果负载Photosan氧化硅纳米空心球在扫描电镜下呈典型的球形,大小较均匀,平均直径约为90nm,表面光滑,高倍透射电镜分析结果显示Photosan负载在氧化硅纳米空心球内,呈壳核结构。Zeta电位和沉降时间分析表明在水中的分散和稳定性能良好。在一定范围内,相同的光敏剂浓度和光照剂量下,产生的光动力效应与光敏剂的孵育时间呈正相关的关系。流式细胞仪检测细胞凋亡显示光照剂量相同的条件下,同等孵育时间的纳米化Photosan更易引起细胞的凋亡(P<0.05)。Western blot检测结果显示在一定范围内,同等孵育时间,纳米化photosan组肿瘤细胞LC3B明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论1、纳米化Photosan具备为人体发挥生物学效应的结构和性能。纳米Photosan光敏剂PDT比普通Photosan光敏剂PDT对人肝癌Huh-7细胞的杀伤作用更高效。2、在一定孵育时间范围内,同等的孵育时间下,纳米化Photosan诱导的肝癌细胞白噬比普通photosan明显低。
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