iTRAQ技术鉴定二氧化硅诱导大鼠肺纤维化模型肺组织中差异表达蛋白的研究

• 作 者: 孟夏
• 出 处: 新乡医学院
• 发表日期: 2016年期
• 关键词: iTRAQ 二氧化硅 肺纤维化 差异表达蛋白

背景肺纤维化（pulmonary fibrosis,PF）是一种肺间质性疾病,其主要表现特点是早期发生肺泡炎症,而在后期出现大量成纤维细胞（fibroblast,FB）的异常增殖转型,并且有细胞外基质（extracelluar matrix,ECM）大量沉积等现象。肺纤维化的发病原因较多,加之诊断后缺乏有效的药物治疗,其预后效果并不理想。矽肺（silicosis）是由于在生产过程中长期吸入游离二氧化硅（SiO₂）含量过高的粉尘达一定量后所引起的以肺组织纤维化为主的疾病,但矽肺的形成机制目前还不十分清楚。本研究以SiO₂导致的大鼠肺纤维化模型为研究对象,全面分析大鼠肺纤维化肺组织之间的差异表达蛋白,以期寻找与肺纤维化相关的关键蛋白。为探索阐明肺纤维化形成、发生发展机制以及肺纤维化的诊断、防治提供新的靶点,奠定重要的理论和实验基础。目的利用同位素标记的相对和绝对定量技术（isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ）鉴定SiO₂诱导的大鼠肺纤维化模型肺组织中差异蛋白的表达。方法建立SiO₂诱导肺纤维化大鼠模型后,分别提取模型组和对照组大鼠肺组织蛋白样品,iTRAQ标记后液相色谱（LC）分离蛋白质,对蛋白质进行质谱鉴定以及生物学信息分析。结果分析鉴定出894个差异表达蛋白,其中表达上调的蛋白443个,表达下调的蛋白451个。这些差异表达蛋白主要参与机体内急性炎症反应、防御反应、补体激活、体液免疫应答、免疫反应、先天性免疫应答、免疫球蛋白介导的体液免疫反应、适应性免疫反应等重要过程。结论用定量蛋白质组技术构建的SiO₂诱导大鼠肺纤维化差异表达蛋白谱系对研究肺纤维化的发生发展有一定理论价值,为临床肺纤维化的治疗提供新的治疗策略奠定了基础。