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目的和背景促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,但对氧化低密度脂蛋白(Oxidized low density lipoprotein,Ox-LDL)诱导的血管内皮细胞凋亡中的Caspases-3亚家族有无影响尚不清楚。我们拟探讨重组人促红细胞生成素(Recombinant human erythropoietin,rhEPO)在预防Ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)凋亡过程中对Caspases-3亚家族的影响。方法体外培养HUVECs,分别加入Caspase-3抑制剂(DEVD-CHO)、Caspase-8抑制剂(z-IETD-fmk)、Caspase-9抑制剂(z-LEHD-fmk)各25μmol/L预孵育24h后,再加入100μg/mL Ox-LDL处理48h,比色法检测Caspase-3,-8,-9活性的变化,噻唑蓝(Methyl thiazolyl tetrazolium,MTF)法检测HUVECs活力。平行实验中,加入不同浓度的rhEPO预处理HUVECs 24h,再加入100μg/mL Ox-LDL处理48h,MTT法检测HUVECs活力,流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测HUVECsCaspase-3蛋白阳性表达率和细胞凋亡率、比色法分别检测HUVECs Caspase-3,-8,-9酶活性。结果Caspase-3抑制剂组HUVECs Caspase-3活性较Ox-LDL组降低(0.80±0.17vs 3.12±1.03,P＜0.05),细胞存活率增加(74.21%±1.68%vs 58.03%±3.21%,P＜0.05);Caspase-8抑制剂组Caspase-8活性较Ox-LDL组降低(0.60±0.16 vs1.03±0.36,P＜0.05),细胞存活率无明显差异(57.24%±4.45%vs 58.03%±3.21%,P＞0.05);Caspase-9抑制剂组Caspase-3,9活性较Ox-LDL组均降低(1.02_+0.21vs 3.12±1.03;1.30±0.42 VS 3.07±0.29,P＜0.05,依次),细胞存活率增加(74.08%±3.64%vs 58.03%±3.21%,P＜0.05)。6.25 IU/ml rhEPO预处理组HUVECsCaspase-3,-9活性、Caspase-3蛋白阳性表达率和细胞凋亡率较Ox-LDL组均降低(10.81±0.67 vs 12.74±1.34,3.64±0.21 vs 5.01±0.36,45.67%±6.65%vs48.93%±3.11%,22.13%±2.16%vs 35.42%±1.32%,P＜0.05,依次);25 IU/ml rhEPO预处理组HUVECs Caspase-3,-9活性、Caspase-3蛋白阳性表达率和细胞凋亡率较Ox-LDL组均降低(6.43±1.06 vs 12.74±1.34,2.03±0.37 vs 5.01±0.36,13.65%±4.46%vs 48.93%±3.11%,13.38%±2.35%vs 35.42%±1.32%,P＜0.05,依次);100IU/ml rhEPO预处理组人HUVECs Caspase-3,-9活性、Caspase-3蛋白阳性表达率和细胞凋亡率较Ox-LDL组均降低(3.65±0.78 vs 12.74±1.34,1.67±0.13 vs 5.01±0.36,3.36%±0.42%vs 48.93%±3.11%,5.77%±1.13%vs 35.42%±1.32%,P＜0.05,依次);而不同浓度rhEPO预处理组HUVECs Caspase-8活性无明显变化(1.01±0.41 vs 1.06±0.23,P＞0.05)。rhEPO预处理对HUVECs Caspase-3,-9活性、Caspase-3蛋白阳性表达率和细胞凋亡率的影响呈浓度依赖性(10.81±0.67 vs6.43±1.06 vs 3.65±0.78:3.64±0.21 vs 2.03±0.37 vs 1.67±0.13;45.66%±6.65%vs13.65%±4.46%vs 3.36%±0.42%;22.13%±2.16%vs 13.38%±2.35%vs 5.77%±1.13%;P＜0.05,依次)。6.25、25、100 IU/ml rhEPO预处理组HUVECs存活率均较Ox-LDL增高(61.23%±3.04%vs 57.24%±1.32%,63.09%±2.67%vs 57.24%±1.32%,74.08%±3.84%vs 57.24%±1.32%,P＜0.05,依次),且与rhEPO浓度呈依赖性(61.23%±3.04%vs 63.09%±2.67%vs 74.08%±3.84%,P＜0.05)。结论rhEPO可抑制Ox-LDL诱导的HUVECs凋亡时的Caspase-3,-9活性水平,且与rhEPO呈浓度依赖性。本研究结果还提示Ox-LDL诱导的HUVEcs凋亡信号通路涉及Caspase-3,9,而与Caspase-8无关。