论文部分内容阅读
该试验主要以枇杷早钟6号、解放钟为材料,着重研究提高成年态茎尖初代培养成活率的方法,茎尖的启动、抽枝,成年态叶片愈伤组织的诱导、胚状体的诱导及发育等问题.主要结果如下:初代培养时,选择生长一段时间的饱满新梢,切割成较大的外植体长约0.8~1.5cm,可提高接种成活率.茎尖的消毒方法:清洗外植体后,用75%乙醇灭菌30s,再用0.1%升汞灭菌2min,最后用无菌水漂洗.可将污染率控制在5%以内.采用正交试验研究了生长调节剂BA、NAA、GA<,3>的不同浓度及配比对茎尖启动率的影响,结果表明,MS附加BA2.0mg/L是最适宜的启动培养基.成年态叶片培养,在不同成熟度的叶片中,最适宜的诱导愈伤组织的是中度成熟叶.最适合的愈伤诱导培养基为MS+BA1.0mg/L+2,4-D0.5mg/L,诱导出来的愈伤组织为黄绿色、颗粒状、硬度适中.适合愈伤组织继代保存的培养基为MS附加BA0.5~1.0mg/L和2,4-D0.1~0.2mg/L.2,4-D的作用不能被IAA或NAA取代.选继代到第四代的黄绿色愈伤(培养基为MS+BA0.5mg/L+2,4-D0.1mg/L)作扫描电镜观察,看到了球形胚.将这种愈伤组织转移到MS附加BA和椰乳、水解乳蛋白及低浓度2,4-D的培养基中,没有胚状体出现.探讨了芽的增殖与生根问题,结果表明,适合芽增殖的培养基是MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L,适合芽生根的培养基为MS+NAA0.1mg/L.初步研究了野生枇杷的茎尖培养和叶片培养.结果表明,台湾枇杷茎尖启动较容易,启动率为72%,怒江枇杷茎尖极容易褐变,成活率极低;台湾枇杷叶片可以在含2,4-D的MS培养基上诱导出愈伤组织,愈伤呈米黄色,适宜的2,4-D浓度为0.2mg/L.