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目的:观察不同剂量哌替啶及哌替啶不同给药时程对SD大鼠齿状回星形胶质细胞形态和GFAP表达的影响。
方法:(1)成年Sprague-Dawley(SD)大鼠36只,体重210~250g,雌雄各半,随机分为6组,(1、2、4、8、16mg/kg剂量组即P1、P2、P4、P8、P16组,等量生理盐水对照组即con组),每组6只。实验组单次腹腔注射相应不同浓度的哌替啶,对照组单次腹腔注射等量的生理盐水,24h后经心脏灌注、取脑。(2)成年SD大鼠30只,体重210~250g,雌雄各半,随机分为5组,实验组单次腹腔注射8mg/kg哌替啶后1、3、7、14天(分别为P8D1、P8D3、P8D7、P8D14组),对照组(con组)单次腹腔注射等量的生理盐水1天后经心脏灌注、取脑。(3)成年SD大鼠24只,体重210~250g,雌雄各半,随机分为4组,分别为对照组(con组)、单次给药1天处死组(D1组)、重复给药7天(ipqd×7)处死组(D7组)、重复给药14天(ipqd×14)处死组(D14组),实验组每次腹腔注射哌替啶8mg/kg,对照组单次腹腔注射等量的生理盐水,在末次给药24h后经心脏灌注、取脑。标本经后固定,恒冷冻切片,GFAP免疫组织化学,激光共聚焦显微镜观察,测定齿状回GFAP阳性星形胶质细胞的数量及体视学参数。
结果:(1)小剂量哌替啶对大鼠齿状回星形胶质细胞的形态及其GFAP表达无影响,当剂量达到8mg/kg及以上时星形胶质细胞GFAP的表达显著增加(p<0.05),单位体积内GFAP阳性细胞数目较对照组明显增多,平均细胞面积有所减小。(2)哌替啶(8mg/kg)给药1天后GFAP的水平增加,GFAP阳性细胞开始增生和分化,给药3天后GFAP的水平继续增加,伴细胞数目增加、体积肥大、侧枝增多,给药7天后GFAP的水平增加达到最高峰,细胞数目进一步增加、体积更肥大、侧枝更丰富,给药14后天GFAP的水平又恢复到正常水平,细胞数目、大小、形态也恢复到给药前正常水平。(3)重复给药(哌替啶,8mg/kg,ip,qd)7天后GFAP的水平较单次给药1天组有所下降,但仍较对照组高,细胞的侧枝开始减少,而继续延长给药时间至14天,GFAP的水平较对照组无显著性差异,细胞胞体皱缩,面积缩小,侧枝稀少。
结论:单次注射哌替啶对星形胶质细胞的形态及其GFAP表达的影响呈剂量依赖性:小剂量哌替啶对大鼠齿状回星形胶质细胞的形态及其GFAP表达几乎无影响,较大剂量时呈时间依赖性影响。单次注射哌替啶后不同时间GFAP阳性细胞的形态变化不同,GFAP上调的机制也不相同。哌替啶单次给药和重复给药对大鼠齿状回星形胶质细胞的形态及其GFAP的表达的影响不尽相同。