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目的：胆囊胆固醇沉着症是因粘膜层及粘膜下层中过量的脂滴积聚所致。巨噬细胞吞噬脂滴后可以变成泡沫细胞,大量的泡沫细胞堆积于淋巴管,常导致淋巴管破坏,甚至影响局部的徽循环,导致脂质回流障碍。病理上,本病可分为两个亚型：弥漫性胆固醇沉着症和胆固醇息肉。其中,前者的粘膜下层脂质回流通道尚存在,药物干预能达到治疗的目的；后者的粘膜下层脂质回流通道受阻,只有手术切除息肉才能达到治疗目的。胆囊胆固醇沉着症脂滴中的主要成分是胆固醇酯,除去上皮细胞中的胆固醇酯对于维持细胞中胆固醇内环境的稳定和保护胆囊的生理功能具有重要意义。很多研究显示过氧化物酶增殖体活化γ受体或者肝X受体α与细胞内胆固醇内环境的稳态密切相关。22(R)-羟基胆固醇既是体内固醇类物质的中间代谢物,又可以上调肝X受体α的蛋白表达量；吡格列酮可以上调过氧化物酶增殖体活化γ受体的蛋白表达量。对于弥漫性胆固醇沉着症,本实验的目的就是判定吡格列酮(过氧化物酶增殖体活化受体-γ的激动剂)可否降低胆固醇沉着症胆囊上皮细胞中胆固醇酯的含量及其作用机理,以及毗格列酮与细胞自身的调控因子肝X受体a能否协同降低胆固醇沉着症胆囊上皮细胞中脂滴含量,进而达到治疗的目的。对于胆囊胆固醇息肉,既要达到切除息肉的目的,又要保留胆囊,以维持其生理功能才是最合理的手术方式。本实验同时建立了腹腔镜内镜双镜联合技术切除息肉保留胆囊的可行性,并进行了保留胆囊后胆囊功能的短期随访。方法：病人来源于东南大学附属中大医院普外科,已通过伦理学验证。手术中取得的胆囊标本,切取粘膜层的一半,行胆囊粘膜上皮细胞原代培养,三天后经毗格列酮(过氧化物酶增殖体活化γ受体激动剂),22(R)-羟基胆固醇(肝X受体α激动剂),或者过氧化物酶增殖体活化受体-γ小RNA的干预后,再使用Western蛋白质印迹法检测细胞中过氧化物酶增殖体活化受体-γ,肝X受体α, ATP-结合盒载体蛋白Al,中性胆固醇酯水解酶蛋白1蛋白含量的变化；并采用荧光定量的方法测量干预过程中细胞内游离胆固醇外流量的变化,最后通过油红O染色的方法直观的观察细胞中脂滴含量的变化。在临床研究方面,选取中大医院普外科的60例胆囊胆固醇息肉患者,术前常规B超检查,采用全身麻醉,腹腔镜下切开胆囊底部,微波热凝胆囊息肉的根部,活检钳取出体外。对所有的病人常规进行随访,术后第1、3、6个月采用B超检测保留胆囊的容积和收缩功能。结果：在胆囊上皮细胞培养中,1 μM的毗格列酮明显的提高了中性胆固醇酯水解酶1和ATP-结合盒载体蛋白A1的表达量。在过氧化物酶增殖体活化受体-γ小RNA的作用下,胆囊上皮细胞内中性胆固醇酯水解酶1和ATP-结合盒载体A1的蛋白含量分别下降到处理前的22.15%和23.62%；但是,10μM22(R)-羟基胆固醇加入到经过氧化物酶增殖体活化受体-γ小RNA干扰后的胆囊上皮细胞后,ATP-结合盒载体Al蛋白含量增加了1.77倍,而中性胆固醇酯水解酶1的蛋白含量没有明显的变化。22(R)-羟基胆固醇可以少量的上调肝X受体α的蛋白表达量,同时增加ATP-结合盒载体Al约56%的蛋白表达量。在用吡格列酮处理过的胆囊上皮细胞,胆固醇外流量随着毗格列酮浓度的增加或作用时间的延长而外流量明显增加。油红O染色也证实1μM的吡格列酮可明显的降低胆囊胆固醇沉着症中脂滴的含量。为了判断细胞自身胆固醇内环境调节因子肝X受体α对吡格列酮的影响,我们采用22(R)-羟基胆固醇联合毗格列酮干预的方式,发现二者共同上调3.64倍ATP-结合盒载体A1蛋白表达量,同时大幅度提高细胞外排游离胆固醇的能力。油红O染色也显示了二者联合应用可以更加明显的降低胆固醇沉着症患者胆囊上皮细胞中脂滴的含量。在临床病例研究中,所有的手术过程是成功的,手术时间60～35分钟。研究过程中发现双镜联合技术更适用于肥胖病人,操作也更方便。所有病人短期随访无任何并发症,无息肉复发；术后3个月,保留胆囊的容积和收缩功能基本上恢复到术前的水平,其后继续随访发现胆囊的功能持续好转,并可以满足生理功能。结论：(1)吡格列酮经“过氧化物酶增殖体活化γ受体-肝X受体α -ATP-结合盒载体Al”通路提高ATP-结合盒载体A1的表达；而增加中性胆固醇酯水解酶1的含量和肝X受体a没有明显的关系。(2)吡格列酮通过增加胆囊上皮细胞中ATP-结合盒载体蛋白A1和中性胆固醇酯水解酶1的表达量,提高了胆固醇酯水解和游离胆固醇外流的能力,进而达到降低胆固醇沉着症胆囊上皮细胞内脂滴含量的目的。(3)细胞自身的调节因子(肝X受体α)和吡格列酮,能够协同作用于“过氧化物酶增殖体活化γ受体-肝X受体α -ATP-结合盒载体Al”通路,更大的增加细胞膜上ATP-结合盒载体Al的蛋白量,促进胆固醇外排,减少细胞中脂滴沉着,进而达到治疗的目的。(4)对于胆囊胆固醇息肉,采用腹腔镜内镜双镜联合技术切除息肉安全、可靠,更加适合于肥胖的病人。