针刺督脉穴位对癫痫大鼠海马神经细胞核转录因子表达的影响

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目的探讨针刺督脉穴位(百会、风府、大椎、陶道、无名、身柱)治疗癫痫可能的作用机制。方法采用氯化锂-匹罗卡品法,建造大鼠癫痫模型。将造模成功的大鼠随机分为3组:EP(癫痫)模型组、西药组和针刺组,每组16只。另取大鼠16只作为正常组。造模成功后,当天开始治疗。针刺组选取督脉穴位(百会、风府、大椎、陶道、无名、身柱)进行针刺;西药组选用丙戊酸钠(300 mg/kg)进行治疗;正常组、EP模型组不做治疗。治疗疗程为14天,每日1次。治疗结束后,进行Morris水迷宫测试。测试结束后,即刻处死全部大鼠,采用HE染色法观察各组大鼠海马组织的病理变化,运用免疫组化染色法测定各组大鼠海马组织NF-κB(P65)蛋白的表达情况,应用PCR检测各组大鼠海马组织NF-κB m RNA的表达量。结果(1)一般状态及行为学观察四组中,正常组大鼠一般情况最好,且无癫痫发作。EP模型组大鼠一般情况最差,饮食欠佳,体重减轻,毛色枯黄脱落,反应迟钝,常伴有自发性的反复发作癫痫行为。针刺组及西药组大鼠,一般情况较EP模型组有所改善,且自发反复癫痫的发作持续时间和发作频率均低于EP模型组大鼠,差异有统计学意义(P<0.05)。针刺组及西药组,两组之间差异不大,差异无统计学意义。(P>0.05)。(2)Morris水迷宫测试结果大鼠平均逃避潜伏期和平均游泳路程比较,正常组短于EP模型组,差异有统计学意义(P<0.05);针刺组及西药组亦短于EP模型组(P<0.05),差异有统计学意义。针刺组及西药组组间差异不大,差异无统计学意义(P>0.05)。(3)HE染色法光镜下的观察结果在光镜下观察海马组织细胞,观察结果显示:正常组大鼠海马组织细胞排列紧密,细胞形态正常;EP模型组大鼠海马组织细胞排列疏松,细胞溶解、变形,染色体边集、固缩、甚至消失;针刺组、西药组大鼠海马组织细胞有不同程度的损伤,但较EP模型组明显改善。(4)免疫组化染色法的鉴定结果正常组大鼠海马组织细胞的细胞浆呈NF-κB(P65)阳性反应,EP模型组大鼠海马组织细胞的细胞核呈阳性反应,针刺组及西药组细胞浆及细胞核均有阳性表达。统计结果显示,EP模型组大鼠海马NF-κB(P65)的IOD值(平均光密度值)表达高于正常组(P<0.05),差异有统计学意义。西药组及针刺组IOD值有所下降(P<0.05),差异有统计学意义。针刺组、西药组之间差异,无统计学意义(P>0.05)。(5)PCR检测NF-κB mRNA表达量EP模型组大鼠海马组织中NF-κB mRNA较正常组显著提高(P<0.05),差异有统计学意义;西药组及针刺组表达水平接近,且较EP模型组有所降低(P<0.05),差异有统计学意义。针刺组、西药组之间差异,无统计学意义(P>0.05)。结论针刺督脉穴位可以改善EP大鼠的学习记忆能力及一般情况,降低EP大鼠的癫痫发作时间和频率,其作用机制可能与抑制海马组织NF-κB mRNA和蛋白的表达有关。
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