论文部分内容阅读
目的： 皮肤鳞状细胞癌（squamous cell carcinoma，SCC）是一种常见的非黑素瘤皮肤癌（nonmelanoma skin cancer，NMSC），近年来发病率有明显上升趋势，传统的治疗主要是外科手术切除、激光和冷冻治疗等，近年来发现ALA-PDT及阿维A在治疗非黑素瘤皮肤癌取得了一定的疗效。目前，尚无ALA-PDT联合阿维A治疗皮肤肿瘤的临床尝试或基础研究。本研究拟探讨ALA-PDT不同处理参数，阿维A不同浓度及处理时间对鳞状细胞癌细胞活性的影响，并进一步研究两者联合处理鳞状细胞癌细胞时是否具有更强的叠加作用，以初步明确ALA-PDT联合阿维A对细胞的影响，为临床上探索皮肤鳞状细胞癌新的治疗方案提供理论依据。 方法： 首先在96孔板上培养SCL-1细胞，配置不同浓度的ALA培养液、孵育不同时间，设定不同参数的功率密度以及光照时间，对皮肤鳞状细胞癌SCL-1细胞进行ALA-PDT处理（633±5 nm的红光），处理后用CCK-8法测定活细胞数量。应用不同浓度的阿维A及作用时间对SCL-1细胞进行处理后，CCK-8法测定细胞增殖，分析不同的阿维A浓度及作用时间对SCL-1细胞的影响。选取合适的ALA-PDT参数及阿维A浓度对SCL-1联合处理，流式细胞仪检测细胞凋亡率。 结果： ⑴在孵育时间固定在2h，ALA浓度范围为1.56×10-2~5×10-1mg/ml时，ALA-PDT处理后SCL-1活细胞数量随着浓度的增加而降低，当ALA浓度达2.5×10-1mg/ml时SCL-1活细胞数量降低不明显。⑵在ALA浓度为6.25×10-2mg/ml，孵育30~180min，ALA-PDT处理后SCL-1活细胞数量随着孵育时间的增加而降低，当孵育时间达150min时SCL-1活细胞数量降低不明显。⑶光照时间固定为16min，光照功率密度为20~80mw/cm2，随着功率密度增大 ALA-PDT处理后SCL-1活细胞数量降低，当功率密度达60mw/cm2趋于稳定。⑷功率密度固定为20mw/cm2，光照2~32min，ALA-PDT处理后SCL-1活细胞数量随着光照时间的延长而降低。⑸阿维A浓度为1.6×10-4~1.6×10-1mg/ml，作用时间1~3d时，作用相同时间时阿维A浓度越高，SCL-1活细胞数量越低；而在相同浓度作用时，作用时间越长SCL-1活细胞数量增长越小。⑹ALA-PDT联合阿维A作用SCL-1细胞的凋亡率高于ALA-PDT和阿维A单独作用的凋亡率。 结论： ①合适参数的ALA-PDT处理对SCL-1细胞具有杀伤作用，其杀伤作用与ALA浓度、孵育时间、光照剂量有关。②阿维A对SCL-1细胞增殖的抑制作用在阿维A浓度为1.6×10-4~1.6×10-1mg/ml，作用1~3d时，与药物浓度和作用时间成正比。③ALA-PDT联合阿维A能提高SCL-1细胞对阿维A的敏感性，增强诱导SCL-1细胞凋亡的作用。