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目的:炎症是人体最常见疾病之一,传统非甾体抗炎药在临床使用过程中存在胃肠道或心血管不良反应,限制了其应用和发展。非甾体抗炎药中的昔康类化合物,如美洛昔康,具有良好的抗炎效果,但考虑到药物的长期使用和对环氧合酶2的选择性较强而导致心血管问题,因此,开发新型非甾体化合物具有现实意义。本研究旨在通过构建体外细胞炎症模型,评价新型昔康类非甾体化合物XK01的体外抗炎活性及其机制,为开发新型非甾体抗炎药提供新的实验依据。方法:利用脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7建立体外炎症细胞模型,将进行的实验细胞分成正常对照组、LPS诱导组、药物对照组(不同浓度的XK01组、阳性对照药美洛昔康组)。首先利用MTT法检测不同浓度XK01与对照药对RAW264.7细胞增殖及活力的影响,确定药物后续实验的使用浓度;用Griess法检测RAW264.7细胞培养上清液中NO的含量;用活性氧检测试剂盒检测细胞ROS的产生;用ELISA试剂盒和RT-PCR检测巨噬细胞炎症介质如TNF-α、IL-1β和IL-6的含量及其转录水平;使用Western Blot和RT-PCR方法检测环氧合酶的蛋白含量及其转录表达水平;最后通过Western Blot和免疫荧光实验分别检测NF-κB通路蛋白p-p65、p-IκBα的表达量、p65在胞核内的表达情况和MAPK信号通路中ERK、p38和JNK总蛋白及其磷酸化的蛋白表达。结果:通过检测不同浓度XK01对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞增殖的影响,选取浓度为0～100μg/ml的XK01用于后续实验。不同浓度XK01可降低LPS诱导产生的NO含量,清除ROS,抑制细胞中TNF-α和IL-6、IL-1β的转录水平,且呈浓度依赖性。XK01对COX-1的表达无显著性的抑制作用,但能抑制炎症产生的COX-2 mRNA和蛋白表达来达到其抗炎效果。此外,就信号通路而言,XK01可阻止NF-κB p65蛋白从胞浆到细胞核的转移,抑制了 p65、IκB和MAPKs蛋白的磷酸化,其中高浓度XK01对p-JNK、p-ERK的抑制作用强于阳性对照药美洛昔康。结论:新型昔康类非甾体化合物XK01在体外细胞炎症模型中可抑制炎症介质和环氧合酶2的表达,具有一定的抗炎效果,其机制可能与NF-κB和MAPK两条信号通路有关。本研究为探讨新型昔康类非甾体化合物XK01的体外抗炎活性及机制研究提供了实验依据,可作为进一步开发的理论基础。