Ach对离体豚鼠心房肌细胞动作电位及乙酰胆碱敏感钾通道电流的影响

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迷走神经在心房颤动(房颤)的发生及发展中有着重要作用。刺激迷走神经可以缩短心房平均有效不应期,减小折返波长指数,刺激迷走神经还能够增加在体心房的不应期离散度,利于房颤发生和维持。刺激迷走或给予乙酰胆碱(Ach)灌注/灌流的方法,已经成为制备房颤动物模型以及研究抗心律失常药物作用机制的重要手段。但是离体灌流的情况下,Ach对心房肌细胞动作电位(AP)及乙酰胆碱敏感钾通道电流(IKACh)的影响报道较少。本实验目的是研究迷走神经递质Ach对离体豚鼠心房肌细胞AP和IKACh的影响。采用常规玻璃微电极法记录豚鼠心房肌AP,观察不同浓度(0.01,0.1,lumol/l)Ach对动作电位参数动作电位幅值(APA),复极化20%、50%和90%的动作电位时程(APD20、APD50和APD90),有效不应期(ERP)及不应期离散度(dERP)的影响,并观察受体的阻断剂阿托品对Ach直接作用的影响;采用主动脉逆行灌流法酶解分离豚鼠单个心房肌细胞,显微镜下选择横纹清晰、折光性好、完整的细胞进行实验;采用全细胞膜片钳技术记录正常IKACh作为对照,观察不同浓度(0.01,0.1,lumol/l)Ach对IKACh的影响。结果表明:Ach能浓度依赖性的缩短离体豚鼠心房肌APD20、APD50和APD90,降低APA,缩短ERP,增大dERP;可明显增高豚鼠心房肌细胞IKACh幅值,且具有浓度依赖性。
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