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目的:当前社会,随着人们饮食习惯的改变和生活节奏的加快,便秘已经成为严重影响人们健康和日常生活工作的一种常见疾病。世界卫生组织专门为此制定了罗马-Ⅲ诊断标准来指导临床便秘的诊断和治疗。其中慢传输型便秘是其中最为常见和严重的一种类型,具体到临床就是指患者出现:大便量太少、太硬、排出太困难,或合并一些特殊症状,如:长时间用力排便、直肠胀感、排便不尽感,甚至需用手法帮助排便;在不使用泻剂的情况下,7天内自发性排空粪便不超过2次或长期无便意。便秘患者特别是慢传输型便秘患者往往是十分痛苦的,而且常常引起其它疾病,危害人类健康。因此,如何更好,更彻底的治愈此病就成为医务工作者的责任,但是治病求因,而当前对于便秘的发病原因的研究尚处于起步阶段,鉴于此,本研究试从分子生物学角度来探讨慢传输型便秘的发病原因。应用免疫组化、图像分析等技术来研究AQP-1、AQP-4在慢传输型便秘患者结肠黏膜上的表达与正常人结肠黏膜上表达的差异来推断,水通道蛋白AQP-1、AQP-4在慢传输型便秘患者疾病发生发展中所起的作用及意义。方法:选取河北医科大学第三医院肛肠外科08年9月份—09年11月份经初诊,详细询问病史、体格检查、实验室检查等排除肠梗阻和巨结肠等其它器质性病变,符合罗马-Ⅲ标准,行3粒标记物120小时法结肠传输试验,结果回报72-120小时尚有≥20%的标记物残存于结肠中的慢传输型便秘患者25例,所有患者均住院行结肠次全切除手术,术后标本取近端升结肠和远端降结肠,每位患者各取两处;取正常人(为无便秘及长期服用泻剂辅助排便病史者,无腹泻等其他类似病史者)的升结肠和降结肠结肠标本20例作为对照组。分组方法:全部标本分为四组,①试验组1:慢传输型便秘患者25例的升结肠结肠标本,男性2例,女性23例,年龄36～71岁,平均年龄48.60±2.00岁,便秘病史1～23年,平均5.25±1.50年;②试验组2:慢传输型便秘患者的降结肠结肠标本,患者资料同①;③对照组1:无便秘史患者升结肠部位标本20例,男性1例,女性19例,年龄33～68岁,平均年龄43.72±1.50岁;④对照组2:同对照组1,取其降结肠部位标本。试验组和对照组的性别、年龄、病史的差别无统计学意义。所取标本全部用4%多聚甲醛灌流固定,24小时后将固定好的组织块经常规梯度酒精脱水,二甲苯透明,石蜡包埋。接下来把包埋好的石蜡块在切片机上,连续切片,厚度为5μm,取其中四片分别裱于涂有蛋白甘油(用于普通HE染色)及多聚赖氨酸(用于免疫组织化学染色)的载玻片上,最后分别用HE和免疫组化的方式给选取的切片染色。最后在高倍镜下分别观察AQP-1、AQP-4的表达并用人工计数和自动图像分析两种方法检测其在正常人结肠与慢传输型便秘患者中结肠的表达差别。结果:1 AQP-1在25例慢传输型便秘患者和20例正常人结肠黏膜上皮细胞顶端、基底侧和腔面都有表达,且主要表达于吸收细胞,杯状细胞有少量表达,表达阳性率为100%。表达部位在升结肠和降结肠无明显差异(p>0.05)。但慢传输型便秘患者(试验组)结肠黏膜细胞上的表达明显高于正常人(对照组)结肠黏膜细胞上的表达。统计学分析后显示慢传输型便秘患者即实验组和正常人即对照组结肠黏膜上AQP-1表达有显著差异,差别有统计学意义(P<0.05)。2 AQP-4在正常人(对照组)升结肠和降结肠结肠黏膜上皮细胞上未见表达,在慢传输型便秘患者(试验组)升结肠结肠上皮细胞有少量表达,降结肠上无表达。其中25例慢传输型便秘患者仅有4例发现有少量AQP-4在升结肠结肠黏膜上皮细胞的基底部位有少量表达,阳性表达率不足20%。统计学分析后显示慢传输型便秘患者即实验组和正常人即对照组结肠黏膜上AQP-4表达无显著性差异,差别无统计学意义(P>0.05)。结论:1 AQP-1在全结肠都有表达,升结肠和降结肠无差异,但慢传输型便秘患者结肠黏膜与正常人结肠黏膜相比显著高表达。说明AQP-1在结肠对于水的重吸收中起了重要作用,可能对于慢传输型便秘的发生、发展有一定的作用。2 AQP-4在本实验研究中正常人的升结肠、降结肠均无表达,在慢传输型便秘患者升结肠有少量表达,而降结肠则无表达。说明AQP-4在人体结肠中对于水的重吸收未起到重要的作用,可能仅仅是少量参与了某些过程,对于慢传输型便秘的发生、发展影响不大。